[发明专利]对微生物群恢复治疗(MRT)组合物所包含活细菌进行定量的分析方法在审
申请号: | 201780043039.3 | 申请日: | 2017-05-12 |
公开(公告)号: | CN109415760A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 贝丝·安妮-舒库德拉克·布朗;约舒亚·埃里克森;马亚·伯勒斯;伊恩·辛克莱;考特尼·R·琼斯 | 申请(专利权)人: | 雷柏奥提斯有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6809 |
代理公司: | 上海和跃知识产权代理事务所(普通合伙) 31239 | 代理人: | 尹洪波 |
地址: | 美国明*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 用于对经由鼻胃管、灌肠和/或胶囊或片剂而递送的药品中的活细菌微生物的定量。可将基于分子的方法,如PMA(叠氮溴化丙啶)‑qPCR(定量聚合酶链式反应)检测用于活细菌的定量。通过应用PMA处理并结合qPCR,可以测定样品中活细菌细胞的数量。 | ||
搜索关键词: | 活细菌 定量聚合酶链式反应 微生物群 灌肠 鼻胃管 递送 叠氮 溴化 微生物 胶囊 细胞 检测 治疗 应用 恢复 分析 | ||
【主权项】:
1.一种用于对微生物群恢复治疗(MRT)药物中的活细菌微生物进行定量的方法,所述方法包括:由微生物群恢复治疗药物制备微生物群恢复治疗药物测试样品;由对照样品制备对照测试样品;用叠氮溴化丙啶(PMA)对所述MRT药物测试样品和所述对照测试样品进行处理;将一部分的所述微生物群恢复治疗药物测试样品等分入测试板的多个独立孔中;将一部分的所述对照测试样品等分入所述测试板的多个独立孔中;使所述测试板暴露于光达在10分钟范围内的时间;从在所述多个独立孔的每个孔中的所述微生物群恢复治疗药物测试样品和在所述多个独立孔的每个孔中的所述对照测试样品中提取出DNA样品;用分子级水将来自在所述多个独立孔的每个孔中的所述微生物群恢复治疗药物测试样品和在所述多个独立孔的每个孔中的所述对照测试样品的所述DNA样品加以稀释;将定量聚合酶链式反应(qPCR)混合物添加到第二测试板的多个孔中;将来自在所述多个独立孔的每个孔中的所述微生物群恢复治疗药物测试样品和在所述测试板的多个独立孔的每个孔中的所述对照测试样品的经稀释DNA样品添加到所述第二测试板的所述多个孔中;将所述第二测试板离心;将所述第二测试板置于qPCR检测系统中并启动热循环器程序;和计算在所述第二测试板的多个独立孔中的各测试样品的总集落形成单位(CFU)每毫升(mL)(CFU/mL)。
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