[发明专利]用于纯化聚乙二醇化的促红细胞生成素的方法在审

专利信息
申请号: 201780042430.1 申请日: 2017-07-13
公开(公告)号: CN109415427A 公开(公告)日: 2019-03-01
发明(设计)人: R·法尔肯施泰因;B·斯彭斯伯格 申请(专利权)人: 豪夫迈·罗氏有限公司
主分类号: C07K14/505 分类号: C07K14/505;A61K47/60
代理公司: 北京市中咨律师事务所 11247 代理人: 沈晓书;黄革生
地址: 瑞士*** 国省代码: 瑞士;CH
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摘要: 本文报道了通过阳离子交换色谱法从反应副产物或未反应的原料中纯化包含促红细胞生成素和单个聚(乙二醇)残基的蛋白质的方法。已经发现,通过应用阳离子交换SP‑650色谱材料和应用第二洗涤步骤,所述第二洗涤步骤与第一洗涤步骤相比具有增加的pH值,可以在单个步骤中以高纯度和收率以及用于大规模应用的适合性获得促红细胞生成素和单个聚(乙二醇)残基的融合蛋白质。
搜索关键词: 促红细胞生成素 洗涤步骤 乙二醇 残基 阳离子交换色谱 大规模应用 反应副产物 聚乙二醇化 融合蛋白质 应用阳离子 色谱材料 高纯度 适合性 收率 蛋白质 交换 应用 发现
【主权项】:
1.用于纯化包含促红细胞生成素和单个聚(乙二醇)残基的蛋白质的方法,该方法包括下述步骤:a)将溶液应用于包含色谱材料的柱,所述色谱材料具有带有磺丙基作为官能团的甲基丙烯酸酯基质,所述溶液包含促红细胞生成素以及促红细胞生成素与聚(乙二醇)的缀合物的混合物,在所述缀合物中每个促红细胞生成素分子具有一个或多个聚(乙二醇)残基,所述柱已经应用了具有约2.4至约2.7的pH的第一溶液,b)应用相对于第一溶液具有增加的pH值的第二溶液,c)将具有增加了或逐渐增加的电导率的溶液应用于柱,从而回收包含促红细胞生成素和单个聚(乙二醇)残基的蛋白质。
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