[发明专利]一种禽流感病毒灭活疫苗的制备方法

摘要

本发明公开了一种禽流感病毒灭活疫苗的制备方法，包括如下步骤：禽流感病毒细胞置于30‑40摄氏度的密封容器内，并向其中通入60‑80%含量的氧气，观察新生细胞的病变程度，提取新生细胞的病变样本，将储存的新生细胞再次置于密封的容器内，并向其中置于反应酶，形成禽流感病毒蛋白，再次向其中添加复合佐剂，采集样本，将检测无菌样本进行超声破碎，再次离心后，收集上清液，即得到禽流感病毒灭活疫苗本发明能够对病毒储放的温度实时监控，并严格控制其的存放温度，自动化控制程度高，能够增加疫苗的形成速率，该疫苗能够有效预防禽流感，适合大范围推广。

主权项

1.一种禽流感病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：选取含有禽流感病毒细胞，并将其保存在零下10‑零下4摄氏度的无菌条件下，且储存需在真空条件下，备用；S2：将S1中保存的禽流感病毒细胞置于30‑40摄氏度的密封容器内，并向其中通入60‑80%含量的氧气，使其快速繁衍，并产生出新生细胞，再次将新生细胞移动至培养基中静置，且保证培养基内的温度始终处在15‑25摄氏度，并对其进行静置200‑240min，此过程，需在无菌条件下进行，以避免细菌与新生细胞发生变异，从而产生不必要的影响；S3：观察新生细胞的病变程度，待新生细胞病变达到一半以上时，缓慢去除培养基，且确保培养基清除干净，并迅速将新生细胞存放环境的温度降低至零下15‑零下12摄氏度；S4：提取S3中的新生细胞的病变样本，将样本温度升高至15‑25摄氏度，并对其内部组织形态进行观察，从而判断其是否能够再次进行反应，若是达到要求，备用；S5：将S3中储存的新生细胞再次置于密封的容器内，并向其中置于反应酶，并在30‑45摄氏度的条件下进行反应，待反应酶完全被新生细胞侵入后，形成禽流感病毒蛋白，然后将其放置在5‑15摄氏度的无菌环境中，备用；S6：待S5中的禽流感病毒蛋白放置3‑6h后，再次向其中添加复合佐剂，并再次将温度升高至20‑30摄氏度，待其反应30‑45min后，形成混合液，将混合液离心处理，去掉上清，然后将其存放在零下30‑零下20摄氏度的无菌环境下；S7：采集样本，将检测无菌样本进行超声破碎，再次离心后，收集上清液，即得到禽流感病毒灭活疫苗。