[发明专利]靶核酸的检测方法在审
| 申请号： | 201711466811.0 | 申请日： | 2012-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN108103145A | 公开（公告）日： | 2018-06-01 |
| 发明（设计）人： | 保坂宪光;东出诚司 | 申请（专利权）人： | 荣研化学株式会社 |
| 主分类号： | C12Q1/6816 | 分类号： | C12Q1/6816;C12Q1/6876 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 唐伟杰 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 本发明的课题是，提供靶核酸的新的检测方法和用于其的试剂盒。设计本发明的检测的方法，错开具有互补性的、荧光标记的引物/探针和猝灭剂(quencher)标记的探针的解链温度(Tm)，使得荧光标记引物优先地与靶核酸退火。检测方法中，不结合至靶核酸的荧光标记引物/探针与猝灭探针结合，从而不发出荧光，所述方法更加简便廉价，不需要特别的技能、设备，就可能检测靶核酸。 | ||
| 搜索关键词： | 靶核酸 检测 探针 荧光标记引物 退火 探针结合 荧光标记 试剂盒 猝灭剂 错开 荧光 解链 引物 猝灭 互补性 技能 | ||
【主权项】：
1.检测样品中存在的1种以上的靶核酸的方法，是含有以下的步骤的检测核酸的方法：(1)向样品添加(A)荧光标记的引物或探针和猝灭剂标记的探针的组合，所述荧光标记的引物或探针：是用荧光剂标记的，是与靶核酸具有互补性的寡核苷酸，且解链温度(Tm)是50～70℃，和所述猝灭剂标记的探针：是被猝灭剂标记的，是与所述荧光标记的引物或探针具有互补性的寡核苷酸，且解链温度(Tm)低于所述荧光标记的引物或探针的解链温度(Tm)、且在25℃以上；或(B)多种的荧光标记的引物或探针和猝灭剂标记的探针的组合，所述荧光标记的引物或探针：是用发光波长不同的荧光剂标记的，是与各自不同的多个靶核酸具有互补性的寡核苷酸，且解链温度(Tm)是50～70℃，和所述猝灭剂标记的探针：是被对应于所述各个荧光剂的猝灭剂标记的，各自是与所述多种荧光标记的引物或探针具有互补性的寡核苷酸，且解链温度(Tm)各自低于所述多种荧光标记的引物或探针的解链温度(Tm)、且在25℃以上；(2)在所述荧光标记的引物或探针的解链温度(Tm)以下、并且在高于所述猝灭剂标记的探针的解链温度(Tm)的温度保温该样品，在保温期间，在等温条件下，利用LAMP法和SMAP2法进行所述靶核酸的扩增；(3)在所述猝灭剂标记的探针的解链温度(Tm)以下的温度，保温该样品；(4)测量结合至靶核酸的荧光标记的引物或探针的荧光。
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