[发明专利]一种丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱及其构建方法和应用

摘要

本发明涉及一种丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱及其构建方法和应用，所述HPLC标准特征图谱包括7个特征峰，以7号峰胡椒碱峰为参照峰，各特征峰的相对保留时间为：1号峰：相对保留时间0.188±0.0094；2号峰：相对保留时间0.460±0.0230；3号峰：相对保留时间0.634±0.0317；4号峰：相对保留时间0.802±0.0401；5号峰：相对保留时间0.908±0.0454；6号峰：相对保留时间0.938±0.0469；7号峰：相对保留时间1.000±0.0500。本发明还包括上述丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法、上述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱在丹绿补肾胶囊检测中的应用。

主权项

1.一种丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱，其特征在于，所述HPLC标准特征图谱包括7个特征峰，以7号峰胡椒碱峰为参照峰，各特征峰的相对保留时间为：

1号峰：相对保留时间为0.188±0.0094；

2号峰：相对保留时间为0.460±0.0230；

3号峰：相对保留时间为0.634±0.0317；

4号峰：相对保留时间为0.802±0.0401；

5号峰：相对保留时间为0.908±0.0454；

6号峰：相对保留时间为0.938±0.0469；

7号峰：相对保留时间为1.000±0.0500。

2.一种权利要求1所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤a、取次射干苷、次野鸢尾黄素和胡椒碱对照品，用50～100％v/v甲醇制成每mL含次射干苷对照品40μg、次野鸢尾黄素对照品20μg、胡椒碱对照品80μg的混合溶液，作为对照品溶液；

步骤b、取丹绿补肾胶囊内容物，用50～100％v/v甲醇配成所述丹绿补肾胶囊内容物浓度为7.2～20.8mg/mL的溶液，过滤，取续滤液作为供试品溶液；

步骤c、用高效液相色谱法测定所述对照品溶液和所述供试品溶液，色谱条件为：采用C18色谱柱，流动相采用A相与B相的混合溶液进行梯度洗脱，检测波长为220nm，柱温为35～45℃，流速为0.9～1.1mL/min，进样量为5～20μL，理论塔板数按胡椒碱峰计算≥5000，其中，所述A相为乙腈，所述B相为0.1～0.3wt％磷酸，所述混合溶液中所述A相的体积百分比为10～70％。

3.根据权利要求2所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤c中所述梯度洗脱的时间及流动相体积比例为：

0～25min，A相：10～25％、B相：90～75％；

25～65min，A相：25～70％、B相：75～30％。

4.根据权利要求2所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤c中所述C18色谱柱的内径为4.6mm，柱长为250mm，填料粒度为5μm。

5.根据权利要求2所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤c中所述柱温为40℃。

6.根据权利要求2所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤c中所述流速为1.0mL/min。

7.根据权利要求2所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤c中所述进样量为10μL。

8.根据权利要求2所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤b中所述溶液的浓度为14mg/mL。

9.权利要求1所述的丹绿补肾胶囊HPLC特征图谱在丹绿补肾胶囊检测中的应用。