[发明专利]一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法

摘要

本发明公开了一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法，包括以下步骤：步骤一、烟草镰刀菌病菌培养；步骤二、菌液的制备；步骤三、烟苗的培育；步骤四、烟苗的前处理；步骤五、接菌；步骤六、调查；最后根据发病情况，即可检测出品种对镰刀菌根腐病的抗性。本发明的鉴定方法具有以下特点，第一，直接利用烟苗鉴定，与移栽到盆内或大田接种病菌相比较，具有以下优点：1、可以省去移栽后盆栽培养烟株繁琐的工作，降低了工作量；漂盘接种，一批可以接种几百‑几千个植株，扩大了接种量；苗期直接接种，还大幅度的缩短鉴定所需的时间。2、使烟草对镰刀菌根腐病的抗性不受生长季节限制，任何季节都能展开鉴定工作等优点。

主权项

1.一种烟草对烟草镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、烟草镰刀菌病菌培养：首先制备马铃薯葡萄糖琼脂培养基，然后将尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌分别接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，在25-30℃条件下培养7-14天，0-4℃储存于冰箱中备用；步骤二、菌液的制备：取发育成长成熟的菌皿，按照菌饼的重量，每皿加入8-12ml纯净水，在匀浆机中打成匀浆，密封备用；步骤三、烟苗的培育：将需要鉴定品种的种子，在漂浮盘内播种，间苗，待烟苗长到5-7叶时备用；步骤四、烟苗的前处理：将步骤三培育的烟苗，选择生长健壮、大小一致的，从漂盘里面拔出，用水冲掉基质，放入不放基质的空漂盘中；步骤五、接菌：将两种病菌按照1:1混均匀，用Hoagland营养液再稀释到32倍，倒入托盘内；托盘大小要以能放入漂盘为准；将处理好的烟苗，连同漂盘，放入托盘内；调整菌液量和苗入水深度，确保三分之二根系没入菌液；同时设置对照组，对照组只用营养液，不加菌，其他所有步骤与实验组相同；步骤六、调查：浸泡烟苗根部一段时间后，幼苗会出现根部变色，叶面萎蔫等症状，参考材料分级标准，将镰刀菌对烟草幼苗的作用分为以下几个级别；“0”无反应：整株烟苗无萎蔫，健康良好；“1”轻度反应：烟草幼苗侧根变色，或老叶下垂；“3”中度反应：烟草幼苗主根变黄变黑，侧根数量不变或新叶下垂；“5”重度反应：整株烟苗萎蔫；“7”重度反应：整株烟苗干枯；病菌接种后第2天开始调查发病情况，随后，每2天调查一次，连续调查5次；根据发病情况，即可检测出品种对镰刀菌根腐病的抗性。