[发明专利]一种从经血中分离宫内膜间充质干细胞的方法有效
| 申请号： | 201711371272.2 | 申请日： | 2017-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN108034634B | 公开（公告）日： | 2021-01-12 |
| 发明（设计）人： | 潘若浪;杜小春;陈茜;戴玲华;王金福 | 申请（专利权）人： | 杭州易文赛生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) 11447 | 代理人： | 耿超 |
| 地址： | 311121 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从月经血中快速高效分离宫内膜间充质干细胞的方法，所述方法为：收集月经血离心除去上层血浆，沉淀a中加入溶液Ⅰ，迅速混匀后，静置1～3分钟，而后加入溶液Ⅱ，混匀后离心，去上清液，获得的沉淀b用培养液悬浮，接种至细胞培养瓶中，48h后换液，除去未贴壁细胞，而后每2～3天换液，长至90％汇合时，消化传代，收集P3代细胞，即为纯化的EnMSCs。利用本发明方法所得EnMSCs在纯度方面与传统方法相比无差异，但本发明所述方法制备时间更短，分离过程耗时不超过15min，本方法所用分离试剂成分简单可控，操作方便，在降低制备成本的同时也提高了安全性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 经血 中分 离宫 内膜 间充质 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从经血中分离宫内膜间充质干细胞的方法，其特征在于所述方法为：收集月经血，离心除去上层血浆，获得沉淀a；向沉淀a中加入溶液Ⅰ，迅速混匀后，静置1-3min，而后加入溶液Ⅱ，混匀后，离心去上清液，获得沉淀b；将沉淀b用细胞培养液悬浮，于37℃，含5％CO2 培养箱中培养，48h后倾倒除去未贴壁细胞，换新鲜细胞培养液，而后每2～3天换液，待细胞长至90％汇合时，消化传代，收集第3代细胞，即为宫内膜间充质干细胞；所述溶液Ⅰ为1～3g/L的NaCl水溶液；所述溶液Ⅱ为15～17g/L的NaCl水溶液；所述细胞培养液组成为：添加体积浓度2％血清替代物的a-MEM基础培养基。
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