[发明专利]一种从经血中分离宫内膜间充质干细胞的方法有效
申请号: | 201711371272.2 | 申请日: | 2017-12-19 |
公开(公告)号: | CN108034634B | 公开(公告)日: | 2021-01-12 |
发明(设计)人: | 潘若浪;杜小春;陈茜;戴玲华;王金福 | 申请(专利权)人: | 杭州易文赛生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) 11447 | 代理人: | 耿超 |
地址: | 311121 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 经血 中分 离宫 内膜 间充质 干细胞 方法 | ||
1.一种从经血中分离宫内膜间充质干细胞的方法,其特征在于所述方法为:收集月经血,离心除去上层血浆,获得沉淀a;向沉淀a中加入溶液Ⅰ,迅速混匀后,静置1-3min,而后加入溶液Ⅱ,混匀后,离心去上清液,获得沉淀b;将沉淀b用细胞培养液悬浮,于37℃,含5%CO2培养箱中培养,48h后倾倒除去未贴壁细胞,换新鲜细胞培养液,而后每2~3天换液,待细胞长至90%汇合时,消化传代,收集第3代细胞,即为宫内膜间充质干细胞;所述溶液Ⅰ为2g/L的NaCl水溶液;所述溶液Ⅱ为16g/L的NaCl水溶液;所述细胞培养液组成为:添加体积浓度2%血清替代物的a-MEM基础培养基;所述溶液Ⅰ与所述溶液Ⅱ体积比为1:1;所述溶液Ⅰ与所述沉淀a的体积比为3~5:1。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于沉淀b用细胞培养液悬浮后,以2×105/cm2密度接种至25cm2塑料细胞培养瓶中。
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