[发明专利]一种富集提取循环肿瘤DNA的方法在审
| 申请号： | 201711366365.6 | 申请日： | 2017-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN109932224A | 公开（公告）日： | 2019-06-25 |
| 发明（设计）人： | 梁鑫淼;李秀玲;张小菲 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人： | 郑虹 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种富集提取循环肿瘤DNA的方法，属生物技术领域。本发明具体步骤如下：1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上样到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100‑1000:1；2)采用5‑200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，3)采用5‑100倍柱体积的洗脱液洗脱得DNA；上述整个过程在10‑60℃进行。所述循环肿瘤DNA富集材料为双组分聚合物功能化材料。本发明方法在提取循环肿瘤DNA方面表现出了高选择性和高通量等特点，可以实现对循环肿瘤DNA的有效分离和富集。 | ||
| 搜索关键词： | 循环肿瘤 固相萃取柱 富集 生物样品 上样液 洗脱液 上样 生物技术领域 双组分聚合物 功能化材料 移液枪枪头 高选择性 有效分离 高通量 淋洗液 质量比 萃取柱 活化 凝胶 吸头 洗脱 冲洗 装入 溶解 平衡 表现 | ||
【主权项】：
1.一种富集提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于采用柱固相萃取模式，具体步骤如下：1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100～1000:1；2)采用5‑200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，淋洗液pH 0‑7；3)采用5‑100倍柱体积的洗脱液洗脱得循环肿瘤DNA，洗脱液pH 10‑12；上述整个过程在10‑60℃进行；所述循环肿瘤DNA富集材料为双组分聚合物功能化材料。
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