[发明专利]免疫细胞用基础培养基的生产方法

摘要

本发明公开了免疫细胞用基础培养基的生产方法，包括如下原料：丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸等，氯化钙、硫酸镁、氯化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、尼克酰胺、D‑泛酸半钙、吡哆醛、硫胺素、核黄素、维生素B‑12、对氨基苯甲酸、叶酸、D‑葡萄糖、酚红、丙酮酸钠、胸苷、谷胱苷肽还原型等。本发明培养基，将免疫细胞数量从1×106(一百万)扩增到5×109(50亿)通常只需要7‑10天时间，且具有很高的NK细胞杀伤活性，达90.9％。

主权项

1.免疫细胞用基础培养基的生产方法，其特征在于，包括氨基酸溶液的制备、无机盐溶液的制备、维生素溶液的制备、无蛋白培养基的制备，具体步骤如下：a：氨基酸溶液的制备，在水溶液中溶解如下成分，丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、胱氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、羟脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸；b：无机盐溶液的制备，在水溶液中溶解如下成分，氯化钙、硫酸镁、氯化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氯化钠；c：维生素溶液的制备，在水溶液中溶解如下成分，生物素、氯化胆碱、酒石酸胆碱、肌醇、尼克酰胺、D-泛酸半钙、吡哆醛、硫胺素、核黄素、维生素B-12、对氨基苯甲酸、叶酸、D-葡萄糖、酚红、丙酮酸钠、胸苷、谷胱苷肽还原型、hepes；d：免疫细胞用基础培养基的制备，将步骤a、b、c中的溶液混合然后配置成1000mL溶液；其中，培养基中各原料的浓度如下：丙氨酸10-100mg/L、精氨酸10-100mg/L、天冬氨酸10-100mg/L、天冬酰氨10-100mg/L、胱氨酸10-100mg/L、谷氨酰胺100-1000mg/L、谷氨酸10-100mg/L、甘氨酸10-100mg/L、组氨酸10-100mg/L、羟脯氨酸10-100mg/L、异亮氨酸10-100mg/L、亮氨酸10-100mg/L、赖氨酸10-100mg/L、蛋氨酸10-100mg/L、苯丙氨酸10-100mg/L、脯氨酸10-100mg/L、丝氨酸10-100mg/L、苏氨酸10-100mg/L、色氨酸10-100mg/L、酪氨酸10-100mg/L、缬氨酸10-100mg/L、氯化钙10-100mg/L、硫酸镁10-100mg/L、氯化钾10-1000mg/L、磷酸二氢钾10-100mg/L、磷酸氢二钠10-100mg/L、碳酸氢钠0.1-5g/L、氢氧化钠0.1-5g/L、氯化钠1-10g/L、生物素1-100mg/L、氯化胆碱1-100mg/L、肌醇1-100mg/L、尼克酰胺1-100mg/L、D-泛酸半钙1-100mg/L、吡哆醛1-100mg/L、硫胺素1-100mg/L、核黄素1-100mg/L、维生素B-12 0.1-100mg/L、对氨基苯甲酸1-100mg/L、叶酸1-100mg/L、D-葡萄糖1000-6000mg/L、酚红1-20mg/l、丙酮酸钠0.1-100mg/l、胸苷10-100mg/L、谷胱苷肽还原型1-100mg/L、hepes 1-10g/L。