[发明专利]一种蕙兰的组培快繁方法

摘要

本发明提供一种蕙兰的组培快繁方法，属于植物组织培养技术领域。该方法包括花梗芽外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养等步骤。其中，外植体的消毒采用酒精消毒和植物消毒液配合消毒的方式，植物消毒液的有效成分是甘草酸、石榴皮提取物、鱼腥草提取物；各个培养阶段中所使用的培养基中添加了黄秋葵汁和桑叶汁作为营养剂。本发明的方法对花梗芽外植体的伤害小，且采用本发明提供的培养基配方可显著提高蕙兰的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率，缩短培养周期，提高蕙兰组培苗的质量。

主权项

一种蕙兰的组培快繁方法，包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养，其特征在于具体步骤为：(1)外植体的消毒：以正在开花、生长健壮、无病虫害的蕙兰作为母本，切取母本花梗上的花梗芽作为外植体，首先用流水冲洗花梗芽，再用体积浓度为75％的酒精浸泡1min‑2min，随后将花梗芽表面的苞叶剥去，接着在植物消毒液中浸泡8min‑15min后继续剥去一层苞叶，随后在所述植物消毒液中继续浸泡5min‑10min，用无菌水3‑5次，得消毒后的外植体；所述植物消毒液由以下重量份的原料混合制成：甘草酸0.05‑0.08份，石榴皮提取物0.8‑1.2份，鱼腥草提取物0.5‑0.8份，OP‑10 2‑4份，水75‑100份；(2)诱导培养：将所述消毒后的外植体的两端切口，将外植体接种在诱导培养基中进行培养，培养时间为45‑48天，培养温度18‑21℃，光照时间为10‑14h/d，光照强度为1500‑2000lx；所述诱导培养基为：VW+3‑5mg/L 2,4‑二氯苯氧乙酸+0.2‑0.4mg/L激动素+40‑55g/L黄秋葵汁+30‑40g/L桑叶汁+8‑12mg/L半胱氨酸+20‑25g/L蔗糖+6‑8g/L琼脂，pH为5.4‑5.6；(3)继代培养：将诱导培养所萌发的小芽自基部剥离后，接种到继代培养基上，培养温度18‑21℃，光照时间为12‑14h/d，光照强度为1500‑2000lx；(4)壮苗培养：继代增殖培养4‑6代后，选择高2cm以上、外植体上有明显突起的小芽苗转入壮苗培养基中培养，培养温度18‑21℃，光照时间为12‑14h/d，光照强度为2500lx，培养至根数为3‑5条，叶片3‑4片，苗高4‑8cm，即可炼苗，炼苗后得到可以移栽的蕙兰幼苗。