[发明专利]一种巨菌草人工种子制作方法

摘要

本发明公开了一种巨菌草人工种子制作方法，包括以下步骤：S1，外植体取材：用小刀将巨菌草茎秆基部的腋芽切下，用作外植体；S2，外植体消毒：将腋芽消毒后，清洗后晾干备用；S3，种芽修整：用小刀修切去上端及不规则部分，用于人工种子制备；S4，人工胚乳成分制备：取海藻酸钠、MS培养基、萘乙酸、吲哚丁酸、蔗糖和活性炭混合，灭菌后备用；S5，人工种芽胶囊制备：将胚乳凝胶溶液注入离心管内，注入CaCl2溶液，固化后形成巨菌草种芽胶囊；S6，人工种皮成分及制备：取海藻酸钠、普鲁兰多糖和羧甲基纤维素钠混合，灭菌后备用；S7，人工种皮包备：将人工种子放入胶囊壳后盖上盖子。本发明适用于草种机械化播种生产，缩短了种子的培养周期，降低了成本，提高了生产效率。

主权项

一种巨菌草人工种子制作方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，外植体取材：取成熟的巨菌草茎秆，斜向扦插在土中，22‑33℃环境促进种间处腋芽萌发，待腋芽萌发约2‑5cm高时，用小刀将巨菌草茎秆基部的腋芽切下，用作外植体；S2，外植体消毒：将收集的腋芽材料放入75％的酒精中消毒30‑40s，然后放入10％次氯酸钠溶液中消毒9‑12min；在无菌操作间内将消毒后的腋芽放入灭菌自来水中清洗3‑5次，之后取出晾干水分，备用；S3，种芽修整：将消毒后的腋芽用无菌小刀修切去上端及不规则部分，留下基部1.4‑1.6cm的短缩节部分用于人工种子制备；S4，人工胚乳成分制备：人工胚乳成分为2.5‑3.5％海藻酸钠、MS培养基、1‑3mg/L萘乙酸、0.2‑0.5mg/L吲哚丁酸、2‑3％蔗糖和0.5‑1g/L活性炭，pH为5.8‑6.2；110‑130℃高温高压灭菌20min；冷却备用；S5，人工种芽胶囊制备：将胚乳凝胶溶液2‑4mL注入10‑20mL离心管内；用注射器吸取3mL 1.5％CaCl2溶液，针头插入离心管底部并注入CaCl2溶液，固化10min后，形成巨菌草种芽胶囊，用无菌水漂洗3次；S6，人工种皮成分及制备：人工种皮成分为5‑7％海藻酸钠、0.8‑1.2％普鲁兰多糖和0.3‑0.6％羧甲基纤维素钠；110‑130℃高温高压灭菌20min后冷却至室温，备用；S7，人工种皮包备：将人工巨菌草种芽胶囊浸入人工种皮溶液中，再用镊子夹出后放入2％CaCl2中固化20min，形成巨菌草人工种皮，用无菌水漂洗3次，晾干表面水分；取合适大小的胶囊壳，用紫外线照射消毒；将人工种子放入后，最后盖上胶囊壳盖子，既得成品巨菌草人工种子。