[发明专利]AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法有效
| 申请号： | 201711123952.2 | 申请日： | 2017-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN107937441B | 公开（公告）日： | 2021-02-26 |
| 发明（设计）人： | 刘晓玫;张春;姜岩;袁运;魏静;王东鑫;王飞飞;魏峥;曹金晶 | 申请（专利权）人： | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/864 | 分类号： | C12N15/864;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人： | 韩飞 |
| 地址： | 215163 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法，其包括：构建含有外源基因的第一重组质粒，并将其包装得到第一rAAV；构建含有AAV Rep78的第二重组质粒，并将其包装得到第二rAAV；第一rAAV和第二rAAV共同转导人成体细胞，将外源基因定点整合于人成体细胞19号染色体的AAVS1位点。采用本发明技术手段得到的基因工程化人成体细胞株能够稳定表达外源基因，将得到的基因工程化人成体细胞株在体外诱导成多能干细胞，能保持干细胞的多能性及分化潜能，并且稳定表达外源基因。本发明可用于赋予细胞新的功能，或用于纠正/补偿由于基因异常/缺陷所引起的疾病，或为干细胞基因治疗提供一种可行的方法。 | ||
| 搜索关键词： | aavs1 定点 整合 基因 ips 细胞 构建 方法 | ||
【主权项】：
AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法，其特征在于，包括：构建含有外源基因的第一重组质粒，并将其包装得到第一rAAV；构建含有AAV Rep78的第二重组质粒，并将其包装得到第二rAAV；所述第一rAAV和第二rAAV共同转导人成体细胞，将所述外源基因定点整合于人成体细胞19号染色体的AAVS1位点。
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