[发明专利]一种牙鲆雌核发育四倍体的诱导方法

摘要

本发明提供了一种牙鲆雌核发育四倍体的诱导方法，属于海洋生物育种技术领域。所述诱导方法是将新鲜的真鲷精子进行紫外线照射进行灭活处理；将灭活真鲷精子和新鲜牙鲆卵子进行混合，将得到的精卵混合液与15～19℃的海水混合3min，然后将精卵混合液转移至0～3℃的海水中冷休克处理40～50min；将处理后的精卵混合液培育45～71min，从精卵混合液筛选出浮鱼卵置于压力为550～750kg/cm²的环境中处理5～7min；将静压处理的浮鱼卵进行流水孵化。本发明建立的方法利用冷休克和静水压法对灭活的异源精子所激活的卵子进行染色体加倍处理，实现了所诱导的四倍体只含有母本遗传信息的目标，同时具有较高的诱导率。

主权项

1.一种牙鲆雌核发育四倍体的诱导方法，包括以下步骤：1)将新鲜的真鲷精子进行灭活处理，得到灭活真鲷精子；2)将所述步骤1)得到的灭活真鲷精子和新鲜的牙鲆卵子混合，将得到的精卵混合液与15～19℃的海水混合；3)待所述精卵混合液与海水混合3min后，将所述精卵混合液转移至0～3℃的海水中进行冷休克处理40～50min，得到冷休克处理的精卵混合物；4)将所述步骤3)中得到的冷休克处理的精卵混合液在15～19℃条件下培育45～71min后，从精卵混合物筛选出浮鱼卵置于压力为550～750kg/cm²的环境中静压处理5～7min，得到静压处理的浮鱼卵；处理浮鱼卵的压力环境在30s内达到设定压力；所述静压处理后，在5s内泄压至标准大气压；5)将所述步骤4)中得到的静压处理的浮鱼卵进行流水孵化，得到牙鲆雌核发育四倍体。