[发明专利]一种维生素K2含量的检测方法

摘要

本发明公开了一种维生素K2含量的检测方法，其解决现有维生素K2检测方法存在应用单一、保留时间较长、色谱条件较复杂的问题。其经过以下步骤：（1）从待测样品中提取维生素K2；（2）待测样品高效液相分析；（3）标准样品溶液的制备；（4）标准曲线建立；（5）浓度获取。本发明采用N，N‑二甲基甲酰胺及异丙醇做提取剂可以方便地提取待测样品中的维生素K2，并采用甲醇与无水乙醇的混合溶剂做流动相能够快速有效地分离待测样品溶液中的维生素K2。本发明的含量测定方法操作便捷，检测效率高，准确度高，各试剂易得且毒性低。

主权项

1.一种维生素K2含量的检测方法，其特征在于：其经过以下步骤：（1）称取待测样品并且置于棕色容量瓶中，加入10mL N,N—二甲基甲酰胺，涡旋震荡分散均匀后，加入25mL异丙醇，震荡至均匀后，超声15‑30min，冷却至室温，用异丙醇定容至刻度，摇匀，得待测样品溶液；（2）将步骤1的待测样品溶液进行高效液相色谱分析，其条件为：色谱柱为C18的反相柱，直径为4‑5 mm，长度为25mm，填料粒径为5微米；流动相包含60‑80重量份的乙醇和40‑20重量份的甲醇；流动相流速为0.8‑1.2 mL/min；柱温为25‑35摄氏度；进样量为5‑20微升；使用紫外可见248nm下进行检测；（3）配制标准样品溶液：称取维生素K2标准样品，制成1.0ug/mL、2.0ug/mL、5ug/mL、10ug/mL、20.0ug/mL的标准样品溶液；（4）建立标准曲线：将步骤3得到的标准样品溶液在步骤2的条件下进行高效液相分析，并且统计其色谱峰的面积，并且以峰面积为纵坐标，已知浓度为横坐标，建立一元一次标准曲线；（5）将步骤2中相应位置的峰面积与标准曲线进行对比，得到其浓度；所述的步骤1中，异丙醇和N,N‑二甲基甲酰胺使用分子筛进行除水，并且在使用前均使用氮气鼓泡30‑50秒。