[发明专利]蛇胆汁的超高效液相色谱-串联质谱鉴别方法

摘要

本发明公开了一种蛇胆汁的超高效液相色谱‑串联质谱(HPLC‑MS/MS)鉴别方法，采用HPLC‑MS/MS方法，建立了蛇胆汁专属性鉴别方法。取样品直接稀释后进行质谱分析，在多反应监测模式(MRM)下进行检测，根据蛇胆汁特征成分判定是否含有蛇胆汁。HPLC‑MS/MS方法快速、灵敏，能准确鉴别样品中是否含有蛇胆汁，拟建立蛇胆汁高专属性、重复性的质量控制方法。

主权项

蛇胆汁的超高效液相色谱‑串联质谱鉴别方法，其特征在于，鉴别方法包括如下内容：（1）样品收集：分别收集原蛇胆汁、生产企业投料的蛇胆汁及其他动物胆汁；（2）对原蛇胆汁进行物质基础研究并对原蛇胆汁及其它动物胆汁的特征成分进行确证；（3）对照药材溶液的制备：取蛇胆汁对照药材约10mg，精密称定，加50%甲醇10mL，超声处理10min，过0.22μm滤膜，即得；（4）原蛇胆汁及其它动物胆汁的制备：分别取各个样品，混匀，精密吸取50μL，置2mL离心管中，精密加入50%甲醇950μL，摇匀，过0.22μm滤膜，即得；（5）液相条件：色谱柱：EcLipse PLus C18柱，柱温35℃，流速0.3mL/min，以甲醇‑10mmoL/L乙酸铵溶液体系，进行梯度洗脱；（6）质谱条件：采用电喷雾电离源（ESI），负离子方式扫描，MRM方式检测；干燥气温度：200℃；干燥气流速：12L/min；雾化气压力：20（psi）；鞘流气温度：350℃；鞘流气流速：11L/min；离子漏斗参数：高压150V，低压60V；毛细管电压：3KV；喷嘴电压：1000V；（7）样品测定：分别精密吸取上述蛇胆汁对照药材溶液、各种原蛇胆汁溶液、其它动物胆汁溶液1μL，进样分析。