[发明专利]一种利用离子色谱法检测生物制品中三羟甲基氨基甲烷（Tris）的方法

摘要

本发明公开了一种利用离子色谱法检测生物制品中三羟甲基氨基甲烷（Tris）的方法。该方法采用脉冲安培检测器、柱后补液衍生的方法，用CS16阳离子交换色谱柱，流动相为甲基磺酸溶液，柱后补液为碱性溶液，采用外标法绘制Tris的浓度‑峰面积标准曲线，得出标准曲线的回归方程，通过该回归方程计算得到Tris的含量。本方法Tris的最低检出限为3.14E‑5 mmol/L，最低定量限为1.05E‑4 mmol/L，回收率为93.8％‑100.1％，重现性范围为0.10％‑0.52％(RSD，n＝5)。本方法无需衍生和复杂样品前处理，不受生物制品中蛋白质上携带的酸碱基团的干扰，也不受样品中阴阳离子的干扰，检测灵敏度高，分析速度快，可应用于相关行业生物制品中Tris的含量检测和质量评判。

主权项

一种利用离子色谱法检测生物制品中三羟甲基氨基甲烷（Tris）的方法，其特征在于：所述测定方法包括如下步骤：（1）供试样品和对照品的制备：生物冻干制品加入注射用水溶解过滤或生物水溶液制品直接过滤，取滤液作为供试品溶液；称取Tris，加入注射用水溶解，梯度稀释后得到不同浓度的Tris溶液作为对照品溶液；（2）离子色谱法：采用脉冲安培检测器，柱后补液衍生的方法；色谱柱为CS16阳离子交换色谱柱；流动相为甲基磺酸溶液；柱后补液为碱性溶液；以Au为电极，Ag‑AgCl电极为参比电极；波形为Carbohydrates；柱温为30℃；（3）计算供试样品中Tris含量：定量分析采用外标法，将配制好的各种浓度的对照品溶液液进样，检测结果，并绘制出Tris的浓度‑峰面积标准曲线，得出标准曲线的回归方程；在与对照品溶液相同的进样条件下进供试品溶液，通过上述回归方程计算得到供试样品中Tris的含量。