[发明专利]用于牛黄真伪鉴别的荧光定量PCR检测的方法和用途有效
| 申请号： | 201711041967.4 | 申请日： | 2017-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN107881243B | 公开（公告）日： | 2022-03-18 |
| 发明（设计）人： | 张文娟;魏锋;马双成 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京攀腾专利代理事务所(普通合伙) 11374 | 代理人： | 彭蓉;陈纤 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于牛黄真伪鉴别的荧光定量PCR检测的探针引物及检测方法，能够用于对牛黄类药材、成方制剂及其他相关产品进行真伪鉴定。本发明还提供了探针引物用于牛黄真伪鉴别的荧光定量PCR检测的用途，所述探针引物为SEQ ID NO：1‑3、4‑6、7‑9、10‑12、13‑15和/或16‑18所示的探针引物组。所述方法采用荧光定量PCR探针法，检测样品中应有的动物源性成分和不应有的动物源性成分。应用于牛黄类药材、成方制剂及其它相关产品的质量控制，所述方法特异性强、灵敏度高、重复性好。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 牛黄 真伪 鉴别 荧光 定量 pcr 检测 方法 用途 | ||
【主权项】：
一种用于牛黄真伪鉴别的荧光定量PCR检测方法，包括下述步骤：称取牛黄样品及样品前处理；从所述样品中提取DNA并制备DNA模板；及选择探针引物；优化反应条件；利用所述探针引物对所述DNA模板进行扩增，其中当所述探针引物与所述DNA模板特异性结合时，DNA聚合酶的外切酶活性将探针切断，荧光基团游离出来从而检测到荧光信号，当探针或引物无法结合模板时，探针处于完整状态，报告基团的荧光被淬灭基团吸收，因此检测不到荧光信号；针对扩增结果，根据设定的CT值临界点判定阳性结果；其中，所述方法能够用于检测所述样品中应有的牛源性成分以及不应有的非牛源性成分。
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