[发明专利]快速构建配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库的方法有效
| 申请号： | 201710999410.5 | 申请日： | 2017-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN107893086B | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 李大卫;汪祖鹏;刘义飞;钟彩虹;黄宏文 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉植物园 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N9/22;C40B50/06 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人： | 黄瑞棠 |
| 地址： | 43007*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种快速构建配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库的方法，涉及基因工程领域中快速构建双元载体的方法。本方法在构建CRISPR‑Cas9双元表达载体基础上，根据特定的基因设计靶标序列设计对应的正反引物，引物具有两个BsaI酶切位点；通过一步PCR得到靶标序列和两个BsaI位点的目的片段，然后通过简单酶切和连接的方式将上述片段构建进入带有Cas9基因的双元表达载体中，形成配对的sgRNA的Cas9载体。本发明能够高效建立随机文库和非随机文库，可以用于植物中基因功能的大规模筛选，同时可以用于多基因间基因互做网络的构建和研究；实验结果证明本方法成功高效地构建了14个靶点（来自14个基因）的随机配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 构建 配对 sgrna cas9 表达 载体 文库 方法 | ||
【主权项】：
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院武汉植物园，未经中国科学院武汉植物园许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710999410.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
