[发明专利]一种罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法

摘要

一种罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法，将罗伊式乳杆菌菌泥中加入磷酸缓冲液，离心得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，冷冻干燥获得罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；向脱脂后鲜羊奶中加入罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和CaCl2酶解，然后再加β‑环糊精，拐枣多糖、低聚木糖、赤藓糖醇、木糖醇、L‑苹果酸，柠檬酸，柠檬酸钠混合均匀后经均质、杀菌后即得到含降压肽的羊乳活性饮料。本发明以羊乳为原料，GRAS微生物——罗伊式乳杆菌的胞壁蛋白酶为生物催化剂，将羊乳中的蛋白质水解成具有ACE抑制活性的寡肽，制备的降压肽羊乳活性饮料可作为辅助降血压、降血糖和防龋齿食品，具有多重保健功能。

主权项

1.一种罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法，其特征在于：1)罗伊式乳杆菌增菌培养基制备：将葡萄糖15‑25g、酵母浸粉15‑25g、硫酸锰0.02‑0.05g、吐温80 0.5‑1.0mL，菊糖1.5‑2.5g、酪蛋白胨4‑6g、磷酸氢二钠4‑6g、亮氨酸15‑20mg添加到纯净水中，定容至1L，调节pH值至5.5‑7.0，于121℃下灭菌得罗伊式乳杆菌增菌培养基；2)罗伊式乳杆菌培养及菌体收集：将罗伊式乳杆菌按2％‑5％的接种量接入罗伊式乳杆菌增菌培养基中，35‑41℃恒温培养18‑24h，然后离心倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得罗伊式乳杆菌菌泥；3)罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶制备：按每g罗伊式乳杆菌菌泥中添加20‑30mL的磷酸缓冲液，35‑45℃保温1‑2h后离心得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，采用1‑3KDa超滤去除小分子物质，然后在保留液中添加CaCl2，控制CaCl2的浓度为8‑15mM，最后通过冷冻干燥获得罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；4)羊乳活性饮料的制备：将鲜羊奶经脱脂后调节pH值至6.0‑8.0按质量体积比向其中加入1‑3％的罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和0.01‑0.04％的CaCl2，于35‑45℃下酶解2‑3h，然后再按质量体积比添加0.5‑1.0％的β‑环糊精，0.2‑0.4％的拐枣多糖、0.3‑0.5％的低聚木糖、4‑6％的赤藓糖醇、3‑5％的木糖醇、0.1‑0.3％的L‑苹果酸，0.10‑0.25％的柠檬酸，0.10‑0.25％的柠檬酸钠混合均匀后经均质、杀菌后即得到含降压肽的羊乳活性饮料，其ACE抑制活性为75‑88％。