[发明专利]重组高温裂解酶的快速纯化方法在审
| 申请号： | 201710937256.9 | 申请日： | 2017-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN107794254A | 公开（公告）日： | 2018-03-13 |
| 发明（设计）人： | 林连兵;刘洋;荣露娟;邓先余;王峰;郭军 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种重组高温裂解酶的快速纯化方法，该方法利用大肠杆菌作为重组高温裂解酶的表达宿主，重组高温裂解酶在大肠杆菌宿主细胞中经诱导表达后，经过离心收集菌体，通过加热使大肠杆菌破裂进而释放出已表达的高温裂解酶，同时在高温下能够使大肠杆菌宿主蛋白变性、失活、沉淀，有利于纯化不易热变性的高温裂解酶，再通过超滤进行细菌碎片截流和裂解酶蛋白浓缩，快速获得较高纯度的高温裂解酶；该方法操作简单，大肠杆菌蛋白热变性去除率高，纯化浓缩效率高，适于工业化生产和市场推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 高温 裂解 快速 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种重组高温裂解酶的快速纯化方法，其特征在于：利用大肠杆菌作为重组高温裂解酶的表达宿主，重组高温裂解酶在大肠杆菌宿主细胞中经诱导表达后，经过离心收集菌体，用pH 6.5‑8.0的磷酸缓冲液将离心沉淀的菌体重新悬浮起来，于60‑80℃热处理 10‑40min，获得破碎液；然后用0.1‑0.45μm的滤膜对破碎液进行超滤，截留大肠杆菌细胞碎片和变性蛋白沉淀，收集滤过液获得裂解酶粗酶液；根据裂解酶的分子量大小，以3K‑100K道尔顿的超滤膜包对裂解酶粗酶液进行截留浓缩，从超滤的浓缩液中获得所需的高温裂解酶，实现对重组高温裂解酶的纯化和浓缩。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于昆明理工大学，未经昆明理工大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710937256.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
