[发明专利]重组高温裂解酶的快速纯化方法在审
| 申请号： | 201710937256.9 | 申请日： | 2017-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN107794254A | 公开（公告）日： | 2018-03-13 |
| 发明（设计）人： | 林连兵;刘洋;荣露娟;邓先余;王峰;郭军 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 高温 裂解 快速 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组高温裂解酶的快速纯化方法，其特征在于：利用大肠杆菌作为重组高温裂解酶的表达宿主，重组高温裂解酶在大肠杆菌宿主细胞中经诱导表达后，经过离心收集菌体，用pH 6.5-8.0的磷酸缓冲液将离心沉淀的菌体重新悬浮起来，于60-80℃热处理 10-40min，获得破碎液；然后用0.1-0.45μm的滤膜对破碎液进行超滤，截留大肠杆菌细胞碎片和变性蛋白沉淀，收集滤过液获得裂解酶粗酶液；根据裂解酶的分子量大小，以3K-100K道尔顿的超滤膜包对裂解酶粗酶液进行截留浓缩，从超滤的浓缩液中获得所需的高温裂解酶，实现对重组高温裂解酶的纯化和浓缩。
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