[发明专利]一种异柠檬酸裂解酶活性测定试剂盒及其方法在审
| 申请号： | 201710928061.8 | 申请日： | 2017-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN107796770A | 公开（公告）日： | 2018-03-13 |
| 发明（设计）人： | 姚金美;赵林川 | 申请（专利权）人： | 苏州科铭生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所31272 | 代理人： | 闵东 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种异柠檬酸裂解酶活性测定试剂盒及其方法，其试剂盒中包括有由Tris‑HCl缓冲溶液、KCl、MnCl2、DTT和EDTA混合成的溶液，由磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液和水混合成的溶液，由MgCl2·6H2O、DTT和NADH混合成的粉剂，乳酸脱氢酶和异柠檬酸。该方法的测定原理为ICL催化异柠檬酸降解为乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，监测340nm吸光度的减小速率间接反映ICL活性。本发明通过酶偶联作用，在紫外波长下检测NADH含量来间接反映ICL活性的高低，能够有效排除有色物质的干扰，大大提高了检测的准确度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 柠檬酸 裂解 活性 测定 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种异柠檬酸裂解酶活性测定试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：提取液，液体100mL×1瓶，由Tris‑HCl缓冲溶液、KCl、MnCl2、DTT和EDTA混合而成，并调pH至7.0，置于100mL容量瓶中，4℃保存；试剂一，液体15mL×1瓶，由磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液和水混合而成，置于15mL试剂瓶中，4℃保存；试剂二，粉剂×1瓶，由MgCl2·6H2O、DTT和NADH混合而成，置于1.5mL EP管中，‑20℃保存；试剂三，液体360μL×1支，由乳酸脱氢酶组成，置于1.5mL EP管中，4℃保存；试剂四，粉剂×1瓶，由异柠檬酸组成，置于5mL试剂瓶中，4℃保存。
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