[发明专利]一种在线标记光敏剂的光催化可视化免疫分析方法

摘要

一种在线标记光敏剂的光催化可视化免疫分析方法，是利用石墨烯能同时吸附核酸与光敏剂的特殊性能，将光敏剂在线的标记于免疫分析过程中的核酸适配体上，在LED灯的照射下，光敏剂产生单线态氧，氧化无色TMB变为蓝色，实现可视化半定量分析，同时通过分光光度法实现定量分析。该法避免使用生物酶，稳定性好，使用的抗体或适配体无需标记，具有成本的优点，用肉眼可检测低至0.1 ng mL^‑1癌胚抗原、血管内皮生长因子等蛋白质。该法可大幅度降低医院免疫分析的成本，也适用于偏远、设备缺乏地区疾病的现场诊断。

主权项

1.一种在线标记光敏剂的光催化可视化免疫分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1) 将抗体溶液在酶标板中孵育洗净后，用牛血清白蛋白封闭剩余位点；(2) 加入抗原标准溶液或样品溶液，孵育一段时间后用超纯水及缓冲溶液洗去剩余的抗体或样品溶液；(3) 加入能识别抗原的适配体DNA，孵育一段时间后用超纯水及缓冲溶液洗去剩余DNA；(4) 向酶标板中加入石墨烯和光敏剂荧光桃红混合溶液，用超纯水及缓冲溶液洗去剩余的石墨烯和荧光桃红；(5) 加入3, 3', 5, 5'‑四甲基联苯胺（TMB）溶液，用LED灯照射一段时间，实现光敏催化氧化TMB显色；(6) 根据（5）溶液颜色进行半定量分析或用分光光度计测定系光度值进行定量分析。