[发明专利]一种软枣猕猴桃花药培养成单倍体植株的方法

摘要

本发明提供了一种软枣猕猴桃花药培养成单倍体植株的方法，包括如下步骤：(A)采集软枣猕猴桃小孢子发育的花蕾，低温冷藏处理1‑10d，剥离花药；(B)将所述花药置于愈伤组织诱导培养基中黑暗培养20d以上，再在植株分化培养基上培养40d以上，最后转移到生根培养基上培养生根，即可。本发明实施例的软枣猕猴桃花药培养成单倍体植株的方法，为软枣猕猴桃育种提供多种纯合的育种材料，提高了选择和育种材料，同时也为基础的理论研究提供了理想的受体材料，而且本发明的花药培养方法相较于离体小孢子培养、体细胞染色体消除等方式操作简便，所以人工培养离体花药是软枣猕猴桃获得单倍体植株的一条有效途径，非常值得广泛推广应用。

主权项

1.一种软枣猕猴桃花药培养成单倍体植株的方法，其特征在于，包括如下步骤：(A)采集软枣猕猴桃单核靠边期的花序顶端的花蕾，低温冷藏处理5d，低温处理的温度为6℃，用自来水冲洗30min，在无菌条件下，将花蕾用75wt％酒精消毒30s，无菌蒸馏水冲洗3～4次，用0.1wt％HgCl₂溶液灭菌5min，无菌蒸馏水冲洗3～4次，剥取花药；(B)将所述花药置于愈伤组织诱导培养基中23℃黑暗培养25d以上长到直径3‑5mm时，愈伤组织诱导培养基的组成包括：以MS培养基为基础，添加生长调节剂，蔗糖，和琼脂，生长调节剂为6‑苄氨基腺嘌呤终浓度5mg/L，2,4‑二氯苯氧乙酸终浓度2mg/L，蔗糖终浓度25g/L，琼脂终浓度5g/L，再在植株分化培养基上培养45d以上，当再生苗长到3cm时，最后转移到生根培养基上培养20d以上生根，即可；所述植株分化培养基的组成为：MS+IBA 0.1mg/L+ZT 3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L；所述生根培养基的组成为：1/2MS+IBA 0.02mg·L^‑1+蔗糖14g/L+琼脂5.0g/L。