[发明专利]一种中性蛋白酶提取胶原的方法在审
| 申请号： | 201710656008.7 | 申请日： | 2017-08-03 |
| 公开（公告）号： | CN107217085A | 公开（公告）日： | 2017-09-29 |
| 发明（设计）人： | 张春红;富勇 | 申请（专利权）人： | 北京华信佳音医疗科技发展有限责任公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100070 北京市丰台区科学城中核*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种中性蛋白酶提取胶原的方法。该方法包括以下步骤，先对牛跟腱进行切片；再将切片清洗浸泡在0.1%‑40%的盐溶液中，浸泡0.5~24h。然后浸泡在中性蛋白酶酶解液中，中性蛋白酶磷酸盐缓冲液为15~120000（W/V），PH在2~8之间。4~50℃环境下反应1~72h；离心，取目的胶原，用摩尔浓度为0.01~5.0mol/L碱溶液调PH至7~12，在2~8℃下保持2~48h，最后用摩尔浓度为0.01~5.0mol/L的酸溶液调节pH值至4~7，收集产物，透析、清洗去除多余离子和杂质，获得胶原。采用本发明提供的中性蛋白酶从牛跟腱中提取胶原的方法维持了胶原的三螺旋结构，能配制多种满足使用要求的胶原液，安全性好，无需高端设备，操作简单。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 中性 蛋白酶 提取 胶原 方法 | ||
【主权项】：
一种中性蛋白酶提取胶原的方法，其特征在于，包括以下步骤，先对牛跟腱进行切片；再将切片清洗浸泡在0.1%~40%的盐溶液中，浸泡0.5~24h，沥去多余水分；浸泡在中性蛋白酶酶解液中，酶解液为中性蛋白酶：磷酸盐缓冲液按1:5~1:20000（W/V）配制而成，酶解液PH在2~8之间；4~50℃环境下反应1~72h；将酶解后的反应物离心，取目的胶原，用摩尔浓度为0.01~5.0mol/L碱溶液调PH至7~12，在2~8℃环境下保持2~48h，最后用摩尔浓度为0.01~5.0mol/L的酸溶液调节pH值至4~7，收集产物，清洁水透析、浸泡清洗至盐的酸根离子满足标准要求，脱水处理，获得胶原。
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