[发明专利]一种赭曲霉素A的无酶免疫传感器的制备及其检测方法

摘要

本发明涉及一种赭曲霉素A（OTA）的无酶免疫传感器的制备及其检测方法，属于免疫分析化学技术领域。本发明在玻碳电极表面层层组装石墨烯和聚乙二醇，构筑高密度OTA抗原传感界面，合成金纳米粒子并制备金纳米粒子探针，采用间接竞争免疫分析原理，包被OTA抗原和OTA目标抗原竞争OTA抗体形成免疫复合物，将金纳米粒子探针与免疫复合物进行反应，电极表面键合的金纳米粒子氧化生成AuCl₄^‑，通过电化学测定AuCl₄^‑还原峰峰电流值的大小达到检测OTA的目的。本发明有利于高灵敏在线检测OTA，样品不必提纯处理，简单快速，检测体系无需酶的使用，降低了检测成本。

主权项

1.一种赭曲霉素A（OTA）的无酶免疫传感器的制备方法，其特征在于包括石墨烯修饰电极的制备，聚乙二醇的修饰，包被OTA抗原的修饰；具体制备方法如下：（1）石墨烯修饰电极的制备：a、0.5 mg 石墨烯分散在 1 mL 乙醇中，超声10分钟，得到0.5 mg/mL 石墨烯分散液；b、在直径为3 mm玻碳电极表面修饰5μL 0.5 mg mL‑1石墨烯分散液，放入干燥器干燥处理；（2）聚乙二醇的修饰：在石墨烯修饰电极表面滴涂5 μL 2 mg/mL 聚乙二醇，用于固定OTA，清洗晾干，保存于4 oC备用；（3）包被OTA抗原的修饰：在工作电极表面滴加10 μL 300 μg/L OTA抗原，湿盒温育1小时后，用0.01 M pH 7.4 （0.05% Tween‑20）磷酸缓冲溶液（PBST）淋洗修饰电极，滴涂10 μL 5% 牛血清蛋白，封闭电极上的非特异性活性位点，保存于4 oC备用。