[发明专利]一种内切酶Mph1103I检测人XPA基因多态性位点rs7045160的方法在审
申请号: | 201710629049.7 | 申请日: | 2017-07-28 |
公开(公告)号: | CN107723356A | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 谢伟;于湛;代丽萍 | 申请(专利权)人: | 郑州大学第一附属医院;河南省医药科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6886 |
代理公司: | 郑州铭晟知识产权代理事务所(特殊普通合伙)41134 | 代理人: | 郭丽娜 |
地址: | 450052 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种内切酶Mph1103I检测人XPA基因多态性位点rs7045160的方法,包括以下步骤抽提待测人基因组DNA;提供扩增人XPA基因多态性rs7045160位点附近序列的上游引物和下游引物,以待测人基因组DNA为模板,利用上游引物和下游引物进行PCR扩增,获取扩增产物;使用限制性内切酶对获取的扩增产物进行酶切,获取相应的酶切产物;将酶切产物采用3%的琼脂糖凝胶进行电泳,以判定XPA基因多态性rs7045160的各基因型。本发明重复性好,操作较简单,成本低,酶切结果容易辨识,适用范围广,是一种进行单碱基突变位点基因型鉴定的好方法,并有望预测食管癌的易感性,用于高发区人群食管癌的早期预警和筛查。 | ||
搜索关键词: | 一种 内切酶 mph1103i 检测 xpa 基因 多态性 rs7045160 方法 | ||
【主权项】:
一种内切酶Mph1103I检测人XPA基因多态性位点rs7045160的方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)抽提待测人基因组DNA;(b)提供扩增人XPA基因多态性rs7045160位点附近序列的上游引物和下游引物,以步骤(a)提取的待测人基因组DNA为模板,利用上游引物和下游引物进行PCR扩增,获取扩增产物;(c)使用限制性内切酶Mph1103I对步骤(b)中获取的扩增产物进行酶切,获取相应的酶切产物;(d)将步骤(c)所得酶切产物采用3%的琼脂糖凝胶进行电泳,以判定XPA基因多态性rs7045160的各基因型;其中,经电泳后有一条条带者为TT基因型,两条条带者为CC基因型,三条条带者为TC基因型;实践证实,携带等位基因C的个体患食管癌的风险明显升高,是食管癌发生的危险因素。
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