[发明专利]一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201710591287.3 | 申请日： | 2017-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN107287144B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 石贵阳;李由然;陈稳;吴志勇;张梁;丁重阳;顾正华 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/75;C12P7/50;C12R1/125 |
| 代理公司： | 32228 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) | 代理人： | 聂启新 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞，所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞的制备方法为：首先经过重组过表达获得一种L‑谷氨酸氧化酶，然后再对枯草芽孢杆菌内源谷氨酸分解途径进行代谢工程改造，最后改造了枯草芽孢杆菌对谷氨酸转运途径，制得所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞，即重组枯草芽孢杆菌。本发明为参与细胞内源代谢的全细胞转化系统的构建及改良提供了实验依据，为利用枯草芽孢杆菌全细胞高效转化L‑谷氨酸生产α‑酮戊二酸提供借鉴。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 代谢 改造 枯草 芽孢 杆菌 生物转化 细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞，其特征在于所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞的制备方法为：/n（1）获取链霉菌Streptomyces sp. X-119-6来源，经密码子优化后的L-谷氨酸氧化酶基因LGOX，编码所述L-谷氨酸氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述L-谷氨酸氧化酶的基因序列如SEQ ID No.2所示；/n（2）将步骤（1）所得L-谷氨酸氧化酶基因LGOX克隆至含有木糖的诱导型表达载体pHY-Bs.xyl上，构建含有L-谷氨酸氧化酶基因的重组质粒pHY-Bs.xyl-LGOX；/n（3）将步骤（2）所得重组质粒pHY-Bs.xyl-LGOX转化至枯草芽孢杆菌WB600中，获得重组枯草芽孢杆菌WB600/pHY-Bs.xyl-LGOX，即重组枯草芽孢杆菌WB602。/n
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