[发明专利]一种杂合抗菌肽MLH的制备方法有效
| 申请号： | 201710572118.5 | 申请日： | 2017-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN107267537B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 龚国利;魏媛;刘莹;蔡文静;张晓旭 | 申请（专利权）人： | 陕西科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/70;C12P21/06;C07K19/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 徐文权 |
| 地址： | 710021 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基因工程技术制备融合抗菌肽的方法，以家蝇抗菌肽、LL‑37和幽门螺杆菌肽为母体肽，利用生物信息学方法分析获得MLH的氨基酸序列，并根据E.coli密码子偏好性编码杂合基因MLH的基因片断。采用SOE‑PCR技术合成所需的目的基因，并将其与表达载体pET‑32a(+)连接，转化至大肠杆菌表达菌株构建重组基因工程菌pET‑32a‑MLH/BL21(DE3)，经IPTG诱导蛋白融合表达，最后对获得的融合表达的杂合肽进行抑菌活性鉴定，结果表明，融合表达的杂合肽对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均有明显的抑菌效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗菌 mlh 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种杂合抗菌肽MLH的制备方法，其特征在于，以家蝇抗菌肽、LL‑37和幽门螺杆菌肽为母体肽，通过合成MLH基因并克隆至质粒形成重组质粒pET‑32a‑MLH；然后转化感受态E.coli BL21，构建重组基因工程菌株pET‑32a‑MLH/BL21；经过IPTG强诱导剂诱导菌体表达，获得融合蛋白；对融合蛋白的分离纯化及复性；最后经EK酶切获得杂合抗菌肽MLH，所述杂合抗菌肽MLH的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；所述杂合抗菌肽MLH的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。
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