[发明专利]一种循环肿瘤细胞分选和/或富集的方法及其试剂盒

摘要

本发明提供了一种循环肿瘤细胞的分选和/或富集的方法，本发明提供的方法利用生物素标记的抗Her2单克隆抗体、生物素标记的抗EpCAM单克隆抗体和生物素标记的抗Trop2单克隆抗体与亲和素包被的磁珠之间极高且稳定的亲和力，提供了一种免疫磁珠方法来分选和/或富集循环肿瘤细胞。本发明还提供了一种用于肿瘤细胞分选和/或富集的试剂盒。本发明的方法可以灵敏地捕获肿瘤细胞，适用于肿瘤细胞的广谱性筛选，并且克服了普通磁珠筛选的位阻效应缺陷，达到高效捕获肿瘤细胞的效果。

主权项

一种循环肿瘤细胞分选和/或富集的方法，所述方法包括以下步骤：1)使用生物素标记抗Her2(人表皮生长因子受体2)单克隆抗体、抗EpCAM(上皮细胞粘附分子)单克隆抗体和抗Trop2(人滋养层细胞表面抗原2)单克隆抗体，并将其混合；其中，三种单克隆抗体混合后的质量百分比范围为：生物素标记的抗Her2单克隆抗体20‑40％；生物素标记的抗EpCAM单克隆抗体10‑25％；生物素标记的抗Trop2单克隆抗体40‑60％；2)将步骤1)得到的混合物加入到待分选的细胞液中；其中，所述混合物与细胞液的体积比为1～5:1000；3)加入链霉亲和素偶联的磁珠，在4℃孵育20分钟，收集磁珠，即得；其中，所述待分选的细胞液与磁珠的体积比是1000:10～30。