[发明专利]水溶性羟基磷灰石荧光纳米颗粒及其制备和用于检测分析PKA的活性和抑制性的方法

摘要

本发明公开了一种水溶性羟基磷灰石荧光纳米颗粒(HAP‑NPs)及其制备和用于检测分析PKA的活性和抑制性的方法；HAP‑NPs的制备是以钙盐和磷酸盐为原料通过水热反应得到，通过HAP‑NPs构建生物分子探针，利用蛋白激酶PKA催化三磷酸腺苷ATP生成ADP和磷酸根，且磷酸根转移到含有丝氨酸的多肽上，使多肽的特定位点发生了磷酸化，磷酸化多肽与HAP‑NPs中的Ca²⁺结合可以使HAP‑NPs发生荧光猝灭的原理，可以实现蛋白激酶PKA及抑制性的分析检测，具有灵敏度高，稳定性好，操作简单、成本低等优点，可以推广应用。

主权项

1.一种水溶性羟基磷灰石荧光纳米颗粒的制备方法，其特征在于：在搅拌条件下，将含柠檬酸钠和磷酸盐的溶液缓慢滴加到pH为8.5~9.5、且含钙盐和聚乙二醇的溶液I中，混合均匀，得到前驱溶液；将所述前驱溶液调节pH值至9~10，并超声分散后，转入反应釜中，在170~200°C进行水热反应2~3.5h，反应液经过冷却，离心处理，调节pH至中性，即得；所述溶液中柠檬酸钠的浓度为0.05~0.3mol/L，磷酸盐的浓度为0.03~0.2mol/L；所述溶液I中钙盐的浓度为0.02~0.2mol/L，聚乙二醇的质量为钙盐质量的1~10%；所述钙盐和磷酸盐的摩尔比为1.5~2:1。