[发明专利]一种亚型Ph‑likeALL的检测方法

摘要

本发明公开了一种亚型Ph‑likeALL的检测方法，包括下列步骤1）分别配制乙醇溶液、预处理液、洗液和酶缓冲液；2）荧光探针溶解；3）将骨髓细胞固化，制成涂片；4）将探针溶液预温到室温，离心，滴加到杂交区域，密封；5）变性杂交；6）除去封片胶，置于考普林缸内洗去盖玻片，取出涂片，用洗液、乙醇溶液漂洗，避光风干；7）复染；8）扫描，确定样本是否有异质性。本检测方法具有简单、快速、成本低、灵敏度高、特异性强、检测全面等优点，能够简单快速全面地检测Ph‑likeALL。

主权项

一种亚型Ph‑likeALL的检测方法，其特征在于，包括下列步骤：1）分别配制乙醇溶液、预处理液、洗液和酶缓冲液，置2℃‑8℃氮气条件储存；2）荧光探针溶解：向探针管内加10~20μl水，加入150~200μl杂交液，超声溶解30~60s，得到探针溶液；3）将骨髓细胞固化，涂抹于玻片上，经过预处理，制成涂片；所述固化为肝素化处理或经EDTA‑醋酸钠处理；4）将探针溶液预温到室温，漩涡混匀，离心2~3s，取5~15μl混匀的探针溶液滴加到杂交区域，盖上盖玻片，用封片胶密封；5）设置程序：先70~80℃变性5~10分钟，然后 35~40℃杂交16~18h；6）除去封片胶，置于考普林缸内的室温洗液中1~5min洗去盖玻片，取出涂片，用已预热至72~74℃的洗液漂洗1~3min，再用室温65~75%乙醇溶液漂洗1~3min，避光自然风干；7）滴加复染液到杂交区域，盖上盖玻片，置‑25~ ‑15℃暗处复染20分钟以上；所述复染液由以下重量份数的组分组成：革兰氏染色液5~7份，氯化镁1~3份，柠檬酸0.2~0.6份，荧光素0.5~0.7份，海藻酸钠0.1~0.3份；8）使用物镜对样本进行扫描，确定样本是否有异质性。