[发明专利]浙江道地性白术的鉴定方法在审
申请号: | 201710435641.3 | 申请日: | 2017-06-11 |
公开(公告)号: | CN107164494A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 陈绍宁;胡秀芳;梁宗锁;吕洪飞;杨东风;贾巧君;丁先锋;陈羽迪 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310018 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种浙江道地性白术的鉴定方法,包括DNA提取,还包括以下步骤1)、PCR扩增,PCR扩增程序为95℃变性5min;95℃变性15s,Tm退火25s,72℃延伸30s;40个循环;引物退火温度为55‑59℃;2)、将扩增产物直接进行HRM,HRM程序为95℃,1min;40℃,1min;65℃,1s;95℃,1min;降温至25℃;收集65‑95℃的荧光信号数据,获得高分辨率熔解曲线;当熔解曲线满足Tm值92℃出现单峰曲线形状时,判定是浙白术。 | ||
搜索关键词: | 浙江 道地 白术 鉴定 方法 | ||
【主权项】:
浙江道地性白术的鉴定方法,包括DNA提取,其特征是还包括以下步骤:1)、PCR扩增:PCR扩增体系:引物F(10μM) 0.2μl引物R(10μM) 0.2μlGreen‑2‑Go Master mix(2×) 5μlDNA 3~15ngRNase free H2O 定容至 10μl;引物F:ATGCGATACTTGGTGTGAAT,引物R:GACGCTTCTCCAGACTACAAT;PCR扩增程序为:95℃变性5min;95℃变性15s,Tm退火25s,72℃延伸30s;40个循环;引物退火温度为55‑59℃;2)、将扩增产物直接进行HRM:HRM程序为:95℃,1min;40℃,1min;65℃,1s;95℃,1min;降温至25℃;收集65‑95℃的荧光信号数据,获得高分辨率熔解曲线;当熔解曲线满足Tm值92℃出现单峰曲线形状时,判定是浙白术。
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