[发明专利]利用等离子体诱变灵芝原生质体以构建突变菌株的方法有效
| 申请号： | 201710418337.8 | 申请日： | 2017-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN107058283B | 公开（公告）日： | 2020-06-26 |
| 发明（设计）人： | 黄青;马玉涵;何华奇;姚国华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/01 | 分类号： | C12N15/01;C12N13/00;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙) 34124 | 代理人： | 王志兴 |
| 地址： | 230031 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用等离子体诱变灵芝原生质体以构建突变菌株的方法，包括如下步骤：(1)灵芝原生质体构建：①灵芝液体培养菌丝体制备；②菌丝体匀浆制备；③细胞壁溶解酶液制备及细胞壁溶解；④原生质体分离及收集；⑤原生质体浓度校正及保存；(2)低温等离子体诱变原生质体：①原生质体诱变前准备；②等离子体诱变装置通气平衡；③反应体系通电，对原生质体进行诱变；④原生质体平板涂布均匀和静置再生培养；⑤诱变菌株挑选；⑥观察记录菌落形态及生长速率，光镜下观察菌丝形态；⑦诱变菌株的活性物质和稳定性检测；⑧保存菌种。本发明的优点在于：提供了一种稳定高效的利用等离子体诱变灵芝原生质体以构建突变菌株的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 等离子体 诱变 灵芝 原生 质体 构建 突变 菌株 方法 | ||
【主权项】：
一种利用等离子体诱变灵芝原生质体以构建突变菌株的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)灵芝原生质体的构建①灵芝液体培养菌丝体的制备；②菌丝体匀浆制备；③细胞壁溶解酶液的制备及细胞壁溶解；④原生质体的分离及收集；⑤原生质体浓度校正及保存；(2)低温等离子体诱变原生质体①原生质体的诱变前准备；②等离子体诱变装置通气平衡；③反应体系通电，对原生质体进行诱变；④固体培养基中，原生质体平板涂布均匀和静置再生培养；⑤诱变菌株挑选，用牙签挑选小菌落后，接种于PDA固体培养基上；⑥观察记录菌落形态及生长速率，光镜下观察菌丝形态；⑦诱变菌株的活性物质和稳定性检测；⑧选取诱变后品质优良的菌株固体培养，保存菌种。
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