[发明专利]一种肝癌早期检测试剂盒的制备方法在审
| 申请号： | 201710355802.8 | 申请日： | 2017-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN107271661A | 公开（公告）日： | 2017-10-20 |
| 发明（设计）人： | 焦绪栋;李文军;秦松 | 申请（专利权）人： | 中国科学院烟台海岸带研究所 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533;G01N33/577;G01N33/574 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙)44316 | 代理人： | 赵勍毅 |
| 地址： | 264003 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种肝癌早期检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤将ELISA板用抗肝癌表面抗原的单克隆抗体溶液包被，再用PBST溶液冲洗；将ELISA板采用含有质量分数为5％的脱脂牛奶或小牛血清白蛋白的PBST溶液进行非结合位点的封闭，再用PBST溶液冲洗；在ELISA板中，每孔中加入肝癌表面抗原溶液孵育，再用PBST溶液冲洗；在ELISA板中，每孔中加入生物素化的抗肝癌表面抗原的单克隆抗体的PBST溶液孵育，再用PBST溶液冲洗；在ELISA板中，每孔加入重组藻蓝蛋白亚基的PBST溶液孵育，再用PBST溶液冲洗，得到肝癌早期检测试剂盒。上述采用重组藻蓝蛋白亚基制备肝癌早期检测试剂盒的制备方法，简单易操作，副产物少，且得到的肝癌早期检测试剂盒稳定性好，荧光性能好，灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肝癌 早期 检测 试剂盒 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种肝癌早期检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将肝癌表面抗原用PBST溶液配制成浓度为0.1‑100ng/mL的肝癌表面抗原溶液，置于4‑6℃备用；将抗所述肝癌表面抗原的单克隆抗体用PBST溶液配制成浓度为5‑10μg/mL抗肝癌表面抗原的单克隆抗体溶液，置于4‑6℃备用；将荧光酶标板用所述抗肝癌表面抗原的单克隆抗体溶液在4‑6℃包被16‑20小时，弃去溶液；将所述荧光酶标板用PBST溶液冲洗；将所述荧光酶标板采用含有质量分数为5％的脱脂牛奶或小牛血清白蛋白的PBST溶液在4‑6℃进行非结合位点的封闭；将所述荧光酶标板用PBST溶液冲洗；在所述荧光酶标板中，每孔中加入所述肝癌表面抗原溶液，于20‑24℃孵育1‑2小时；将所述荧光酶标板用PBST溶液冲洗；在所述荧光酶标板中，每孔中加入生物素化的抗肝癌表面抗原的单克隆抗体的PBST溶液，于20‑24℃孵育1‑2小时；将所述荧光酶标板用PBST溶液冲洗；在所述荧光酶标板中，每孔加入重组藻蓝蛋白亚基的PBST溶液，于20‑24℃孵育1‑2小时；将所述荧光酶标板用PBST溶液冲洗，得到所述肝癌早期检测试剂盒。
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