[发明专利]猪凝血酶的制备方法及其生产系统

摘要

本发明提供猪凝血酶的制备方法，为抗凝血浆经阴离子交换凝胶初提、洗脱，依次加入氯化钙和卵磷脂进行激活后超滤浓缩，病毒灭活，再经阳离子交换凝胶纯化、洗脱、超滤浓缩后病毒过滤，得凝血酶溶液；其中，阳离子交换凝胶为CM葡聚糖阳离子交换凝胶。与现有技术相比本发明提供的猪凝血酶制备方法，一次纯化即可使凝血酶纯度达到≥500单位/mg固含物，可直接用于凝血酶冻干粉的生产，无需二次纯化；操作简单，反应时间短，减少生产步骤，生产周期短，降低了生产成本，适用于工业生产，具有极大的市场价值。

主权项

权利要求1所述的猪凝血酶制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤a)新鲜猪血制备成抗凝血浆，经阴离子交换凝胶初提，首次洗脱，得凝血酶原溶液；步骤b)步骤a所得凝血酶原溶液加入氯化钙和卵磷脂激活，浓缩得初级凝血酶溶液；步骤c)将步骤b所得初级凝血酶溶液进行S/D病毒灭活，得初级S/D凝血酶溶液；步骤d)将步骤c所得初级S/D凝血酶溶液用CM葡聚糖阳离子交换凝胶吸附纯化，再次洗脱，浓缩得浓缩凝血酶溶液；步骤e)将步骤d所得浓缩凝血酶溶液进行除病毒过滤，得凝血酶溶液。