[发明专利]一种镉污染底泥的微生物修复方法

摘要

本发明公开了一种镉污染底泥的微生物修复方法，属于底泥微生物修复领域。所述方法包括硫酸盐还原菌的富集、驯化与扩大培养；硫酸盐还原菌修复Cd污染底泥。该方法通过将分离鉴定后的硫酸盐还原菌复合菌添加至Cd污染底泥中，能降低Cd的可交换态和碳酸盐结合态含量，提高铁锰氧化物、有机物结合态和残渣态含量，使Cd向稳定态转变，并使修复后底泥间隙水中Cd含量明显下降，从而降低Cd的迁移性、生物有效性和毒性，具有技术简便、成本低、修复效果好和原位应用潜力等特点。

主权项

一种镉污染底泥的微生物修复方法，其特征在于：包括以下两个步骤，步骤一：硫酸盐还原菌的富集、驯化与扩大培养；(1)培养基：KH2PO4 0.5g/L，NH4Cl 1g/L，CaSO4 1g/L，MgSO4·7H2O 2g/L，乳酸3.5g/L，酵母膏1g/L，抗坏血酸0.1g/L，巯基醋酸0.1g/L，FeSO4·7H2O 0.5g/L，超纯水1L，调节pH在7.0～7.5之间；(2)菌种富集：挑取2g水库天然底泥样品，放入50mL具塞玻璃管中，加入9mL的0.75％的生理盐水，得到10‑1的稀释液；摇匀后，吸取2mL的底泥稀释液加入到灭菌后的含有300mL培养基的锥形瓶中；用封口膜密封锥形瓶，将其放入30℃恒温培养箱中培养；2～3天后，富集到SRB菌液；(3)菌种驯化：吸取15mL富集得到的SRB菌液加入到另一个300mL的培养基中，进行下一次纯化培养，如此重复操作三次纯化培养；(4)菌种扩大培养：按上述(1)中的培养基配方称取各组分后，使用超纯水定容到1L，轻摇，待药品充分溶解后，转移到300mL锥形瓶中，用铝箔纸封口，放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌后备用，灭菌条件为121℃，20min；其中，巯基醋酸和抗坏血酸需要单独配制成质量百分比含量为10％的溶液，进行高压蒸汽灭菌；每300mL培养基中加入15mL驯化后的SRB菌液进行扩大培养，待出现黑色后即可用于底泥修复；步骤二：硫酸盐还原菌修复Cd污染底泥；在室温条件下，先将湿重为800g的底泥装入2000mL烧杯中；加入超纯水定容至1800mL；然后加入步骤一中扩大培养的菌液300mL；匀速搅拌使培养基与底泥充分混合；烧杯经保鲜膜密封后，放置在30℃的生化培养箱中，进行为期166天的修复。