[发明专利]一种抗肿瘤海蟑螂提取物及其制备工艺与检测方法与用途

摘要

本发明属于天然药物领域，涉及一种海蟑螂提取物及其制备工艺及其检测方法与用途。该海蟑螂提取物是采用超微粉碎、仿生提取、高压脉冲电场提取以及大孔吸附树脂进行柱层析分离纯化等步骤制成的。该方法制备的海蟑螂提取物中不仅腺苷质量多，而且纯度高。本发明还提供了采用高效液相色谱仪对该海蟑螂提取物中腺苷进行含量测定的方法。本发明还提供了该海蟑螂提取物注射液以及该注射液的制备方法及其制药用途。

主权项

一种海蟑螂提取物，其特征在于，该海蟑螂提取物是采用如下方法制备的：（1）将海蟑螂置烘箱内25℃～35℃烘干，采用气流粉碎机对干燥的海蟑螂进行超微粉碎，气流粉碎机的气流压力为700～900kPa，进料速度为170～190r·min‑1，分级频率为35～45Hz，粉碎时间为15～25min，得海蟑螂超微粉A；（2）取步骤（1）所得海蟑螂超微粉A，加入25～35倍量的仿生提取溶媒，35～40℃水浴加热，搅拌提取0.5～2h，离心10～30min，离心速度2700～2900r/min，分别收集上清液B和沉淀C；上清液B浓缩，得浸膏D，备用，沉淀C备用；上述仿生提取溶媒是由0.1%～0.3%氯化钠、0.2%～0.4%胃蛋白酶、0.2%～0.4%胰蛋白酶及0.01mol·L‑1～0.03mol·L‑1盐酸配制成溶液；（3）取步骤（2）所得沉淀C，进行高压脉冲电场提取，工艺条件为电场强度25～35kV/cm，脉冲数35～45，温度30～40℃，料液比为1g：30～40mL，加入浓度为80～90％的乙醇作为提取液，提取40～50min，提取液滤过，滤液回收乙醇，得浸膏E，备用；（4）取步骤（2）所得浸膏D和步骤（3）所得浸膏E合并，混匀，进行柱层析分离；选用D101B型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1：10～12，上样体积10BV～12BV，水洗8BV～10BV除杂，以苯二甲酸二丁酯：0.2mol/L磷酸溶液=1：4～6的洗脱剂10BV～14BV洗脱，流速为2BV/h～4BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得海蟑螂提取物。