[发明专利]一种提纯植物多糖的方法

摘要

本发明公开了一种提纯植物多糖的方法，属于食品分离纯化领域。该方法是将样品进行蛋白酶酶解，干燥后，利用三氟甲磺酸切割结合多糖的多肽，采用芴甲氧羰酰氯法或氯甲酸叔丁酯法将游离多肽的氨基端衍生化，用乙酸乙酯萃取去除多酚及衍生化的多肽物质，制备得到纯化过的多糖。此方法的优点在于：1、此方法提纯后，蛋白和多酚的含量大幅度降低。2、本发明分离出的高纯度的多糖。

主权项

1.一种提纯植物多糖的方法，其特征在于，将样品进行蛋白酶酶解，干燥后，利用三氟甲磺酸切割结合多糖的多肽，采用9‑芴甲氧羰基法或叔丁氧羰基法将游离多肽的氨基端衍生化，用乙酸乙酯萃取去除多酚及衍生化的多肽物质，制备得到纯化过的多糖；所述的蛋白酶酶解：将蛋白样品加入蒸馏水混匀，其底物浓度30~70 g/L，调节pH至8~9，温度45~55℃，加入蛋白酶与底物比为0.5~2.5%的碱性蛋白酶，酶解时间5~12 h，沸水浴灭酶10~20 min，离心取上清液，冻干；所述的三氟甲磺酸切割结合多糖的多肽：准确称取绝干样品加入到预冷的样品管中，按0.3 mL/mg样品的比例加入三氟甲磺酸，快速封口，轻摇2~5 min使样品溶解，于4℃下保温30~60 min，偶尔摇动，样品管中加入少量2%溴酚蓝指示剂，于‑20℃下预冷，在干冰甲醇浴的环境下，用预冷的60%吡啶滴定，直至溴酚蓝变成浅紫色或蓝色，此时溶液pH约为6.0，最后用去离子水透析并冷冻干燥。