[发明专利]一种磷脂酶D的基因挖掘及其应用方法在审
申请号: | 201710292991.9 | 申请日: | 2017-04-28 |
公开(公告)号: | CN107164397A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 史劲松;许正宏;周文斌;龚劲松;许泓瑜;李恒 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/16;C12N15/70;C12P13/06 |
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地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种基于基因挖掘方法获得的磷脂酶D及其基因编码序列与应用方法。该磷脂酶D基因全长1,614bp,编码538个氨基酸,以质粒pET28a(+)为表达载体,以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)为表达宿主,实现了磷脂酶D的高效表达。该磷脂酶D基因的基因挖掘方法简易便捷,经挖掘获得的目标基因所构建的重组菌株经发酵诱导可以分泌磷脂酶D,该磷脂酶D的最适反应温度为60℃,最适反应pH为7.5,且Ca2+对其酶活具有较好的激活促进作用。该酶能对磷脂进行改性,催化底物磷脂酰胆碱和L‑丝氨酸合成磷脂酰丝氨酸,在食品、医药和保健行业具有良好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 磷脂酶 基因 挖掘 及其 应用 方法 | ||
【主权项】:
一种用于携带磷脂酶D编码基因的质粒,其特征在于:质粒可选择pET系列、pMA5、pWB系列、pPICZα、PIC9K、pDXW系列中的任一种,并含有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
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