[发明专利]一种牛血清质量评价的方法有效

专利信息
申请号: 201710283822.9 申请日: 2017-04-26
公开(公告)号: CN106980023B 公开(公告)日: 2018-12-21
发明(设计)人: 徐家华;陈瑞爱;刘郁夫;路静;张舒琼;吴达兴;廖世昌 申请(专利权)人: 肇庆大华农生物药品有限公司;华南农业大学
主分类号: G01N33/96 分类号: G01N33/96
代理公司: 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 代理人: 谢嘉舜
地址: 526238 广东省*** 国省代码: 广东;44
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明公开一种牛血清质量评价方法,包括以下步骤:1)消化:使用0.25%EDTA‑胰酶溶液消化细胞,分散成单个细胞;2)加培养基:取两份单个细胞,分别加入含5%被评价牛血清的培养基10mL,混匀;3)进行1000、10000、10000倍稀释,加至96孔细胞板;4)挑选出含有单个细胞的孔;5)计数:分别在48h、72h、96h计数。该方法可以避免由于牛血清浓度差异导致细胞增殖不好,能快速高效地筛选出高品质牛血清。
搜索关键词: 种牛 血清 质量 评价 方法
【主权项】:
1.一种牛血清质量评价方法,包括以下步骤:1)消化:使用0.25%EDTA‑胰酶溶液消化生长状态良好且致密的细胞,使细胞分散成单个细胞;2)加培养基:取两份步骤1)得到的细胞,编号A、B,向A号细胞中加入含5%被评价牛血清的培养基10mL,混匀;向B号细胞中加入10%被评价牛血清的培养基10mL,混匀;所述培养基为DMEM培养基;3)稀释:用5%被评价牛血清的培养基对A号细胞进行1000、10000、10000倍稀释,将细胞溶液加入96孔细胞板,每孔200μL;用10%被评价牛血清的培养基对B号细胞进行1000、10000、10000倍稀释,将细胞溶液加入96孔细胞板,每孔200μL;4)挑选:在显微镜下面观察细胞的状态,筛选出含有单个细胞的孔;统计A号细胞和B号细胞单个细胞的孔的数量之和;5)计数:分别在48h、72h、96h显微镜观察步骤4)的单个细胞的孔内的细胞状态并统计细胞增殖数量。
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