[发明专利]一种用于哺乳动物细胞蛋白质递送工程菌株的构建方法及应用在审
| 申请号： | 201710242405.X | 申请日： | 2017-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN107099495A | 公开（公告）日： | 2017-08-29 |
| 发明（设计）人： | 白芳;金守光;靳永新;刘颖;李振鹏;吴卫辉;程志辉 | 申请（专利权）人： | 南开大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/85;C12R1/385 |
| 代理公司： | 天津佳盟知识产权代理有限公司12002 | 代理人： | 侯力 |
| 地址： | 300071*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于哺乳动物细胞蛋白质递送的基因工程菌株的构建方法及其应用。构建方法是，将铜绿假单胞菌PAK菌株基因组中4种毒力因子exoS,exoT,exoY,ndk基因删除，使其对哺乳动物细胞无细胞毒性；进一步从染色体上删除抑制细菌III型分泌系统(T3SS)的popN基因，使其T3SS介导的蛋白质注入量显著提高，从而构建出工程菌株Δ5。本发明构建的工程菌株Δ5可用于对多种哺乳动物细胞系实施蛋白质递送，进行基因编辑，细胞重编程，蛋白质功能研究等工作。可实施递送的细胞类型广泛，包括人和鼠的皮肤细胞、肌细胞、肠道细胞、肝细胞、多能干细胞等。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 哺乳动物 细胞 蛋白质 递送 工程 菌株 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种用于哺乳动物细胞蛋白质递送的基因工程菌株的构建方法，其特征是：将铜绿假单胞菌PAK基因组中4个毒力因子exoS,exoT,exoY,ndk基因删除，使铜绿假单胞菌对哺乳动物细胞无细胞毒性，获得基因敲除株Δ4；将Δ4菌株中抑制III型蛋白分泌系统(T3SS)的popN基因从染色体上删除，使细菌T3SS介导的蛋白质注入量显著提高，最终获得工程菌株Δ5。
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