[发明专利]一种羧肽酶A固定化酶的制备方法有效

专利信息
申请号: 201710231083.9 申请日: 2017-04-11
公开(公告)号: CN107058278B 公开(公告)日: 2020-06-05
发明(设计)人: 熊科;李秀婷;支慧伟;高思宇;熊苏玥 申请(专利权)人: 北京工商大学
主分类号: C12N11/082 分类号: C12N11/082;C12N9/48
代理公司: 济南泉城专利商标事务所 37218 代理人: 李桂存
地址: 100048 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种羧肽酶A固定化酶制备的方法。发明采用树脂AB‑8为载体对酶进行吸附‑交联复合固定化,经优化得到的最佳固定化条件:吸附温度35℃、吸附时间12h、戊二醛浓度0.35%、交联时间1h、交联温度25℃。酶固定化后其性质为:最适pH为7.0,最适温度40℃,与固定化前基本保持一致,且温度稳定性提高5℃。采用固定化酶降解赭曲霉毒素A,其Km值为11.50μg/ml,Vmax为97.09μg/mg,Kcat值为324。酶固定化后,其酶促反应的Vmax无显著下降,催化效率与高于未固定的酶。与现有技术相比,本发明提供的方法工艺简单、成本低,且具有酶性质稳定、固定化效率高和酶活回收率高等特点。
搜索关键词: 一种 羧肽酶 固定 制备 方法
【主权项】:
一种羧肽酶固定化方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)酒精浸泡活化的AB‑8树脂作为固定化材料;(2)将(1)中活化的载体加入磷酸缓冲液,调pH为6.0至8.0,在一定温度条件下,将酶与固定化载体进行吸附;(3)将吸附酶后的载体在一定温度下采用戊二醛交联;(4)将(2)中所得的固定化酶冷冻干燥后即可。
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