[发明专利]一种调控玻璃化冷冻牛卵母细胞中钙离子浓度的方法有效
| 申请号： | 201710193362.0 | 申请日： | 2017-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN107047539B | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | 赵学明;王娜;朱化彬;李崇阳;赵亚涵;郝海生 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种调控玻璃化冷冻牛卵母细胞中钙离子浓度的方法，其是将体外成熟22h的牛卵母细胞置于含BAPTA‑AM的体外成熟液中孵育2h，然后采用OPS技术，用含10μM BAPTA‑AM和1μM RR的玻璃化冷冻液进行冷冻，解冻后在含RR的体外成熟液中恢复30min，可使玻璃化冷冻牛卵母细胞的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数，以及体外受精能力、发育能力得到显著性提高。本方法具有操作简单，成本低，对卵母细胞无毒无害，能有效保护冷冻卵母细胞的线粒体功能及其发育能力，这对于拓展冷冻卵母细胞的应用范围，具有重要的理论和实际意义，将在牛卵母细胞超低温冷冻研究领域发挥巨大作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 调控 玻璃化 冷冻 牛卵母 细胞 离子 浓度 方法 | ||
【主权项】：
一种用于牛卵母细胞冷冻保存的玻璃化冷冻液，其特征在于，所述冷冻液中含有5‑20μM BAPTA‑AM和0.5‑2μM RR，用EDFSF40液配制；其中，所述EDFSF40液由EG、DMSO和FSF液按照体积比2﹕2﹕6组成；FSF液为含有30w/v％聚蔗糖70、0.5M蔗糖和20％FBS的DPBS溶液，不含钙镁。
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