[发明专利]一种S-核糖基高半胱氨酸裂解酶基因重组表达载体及其表达方法和应用有效
| 申请号： | 201710141426.2 | 申请日： | 2017-03-10 |
| 公开（公告）号： | CN106834328B | 公开（公告）日： | 2020-05-01 |
| 发明（设计）人： | 罗义勇;宋晓东;柳陈坚 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N9/88;C12P17/04 |
| 代理公司： | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650000 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种S‑核糖基高半胱氨酸裂解酶基因重组表达载体及表达方法和应用，所述基因重组表达载体通过以下方法得到：限制性内切酶Hind Ⅲ和Xho Ⅰ分别对pET28‑a载体和PCR扩增出的LuxS基因纯化产物进行同步酶切，分别获得带有Hind Ⅲ和Xho Ⅰ粘性末端的luxS基因片段和pET28‑a载体大片段，采用琼脂糖凝胶电泳后分别进行回收后，luxS基因片段和载体片段进行连接，得到连接产物，连接产物导入到大肠杆菌BL21感受态细胞中，大肠杆菌BL21中含有基因重组表达载体pET28a‑luxS。本发明获得的蛋白质在细菌交流介导的有益性状开发和有害性状控制的研究及应用领域具有巨大潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 核糖 半胱氨酸 裂解 基因 重组 表达 载体 及其 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种S‑核糖基高半胱氨酸裂解酶基因重组表达载体，其特征在于，所述基因重组表达载体通过以下方法得到：限制性内切酶HindⅢ和XhoⅠ分别对pET28‑a载体和PCR扩增出的LuxS基因纯化产物进行同步酶切，分别获得带有HindⅢ和XhoⅠ粘性末端的luxS基因片段和pET28‑a载体大片段，采用琼脂糖凝胶电泳后分别进行回收后，luxS基因片段和pET28‑a载体大片段进行连接，得到连接产物，连接产物导入到大肠杆菌BL21感受态细胞中，大肠杆菌BL21中含有基因重组表达载体pET28a‑luxS。
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