[发明专利]一种可溶性草酸氧化酶的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201710133625.9 | 申请日： | 2017-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN106906227B | 公开（公告）日： | 2020-02-21 |
| 发明（设计）人： | 汪小锋;吴玉峰;刘文山;汪卫;宋保平 | 申请（专利权）人： | 武汉康复得生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/02;C12N9/88;C12N1/21;C12Q1/527;C12Q1/28;C12Q1/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 胡建文;张瑾 |
| 地址： | 430050 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于高效表达可溶性草酸脱羧酶的重组表达框，同时发明一种能在大肠杆菌中高效表达可溶性且有活性的草酸氧化酶的制备方法，并将细胞破碎液上清通过硫酸铵沉淀，用柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液复溶后的含草酸氧化酶的溶液，直接用于草酸脱羧酶活力测定。这种测定方法与传统的方法如市售的测定草酸的试剂盒和HPLC法相比，精确度和灵敏度较高，耗时短，成本低，易于通过酶标仪对大量的样品进行高通量测定，具有很好的实用性。本发明中制备的草酸氧化酶还可用于其它以草酸为底物或产物的酶的活力的测定，还可用于人和动物的血液和尿液以及各种含草酸的样品中草酸含量的测定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 可溶性 草酸 氧化酶 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种用于高效表达可溶性草酸氧化酶的重组表达框，其特征在于，其包括大肠杆菌启动子，草酸氧化酶基因和终止子，其中所述草酸氧化酶基因为SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7所示的核苷酸序列。
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