[发明专利]一种鹰嘴豆三萜皂苷对照品的制备方法

摘要

本发明提供了一种鹰嘴豆三萜皂苷对照品的制备方法，包括如下步骤（1）鹰嘴豆的提取；（2）碱修饰；（3）大孔吸附树脂柱色谱分离；（4）制备高效液相色谱分离得3β‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基‑(1→2)‑β‑D‑吡喃半乳糖基‑22β,24‑二羟基‑齐墩果‑12‑烯对照品。高效液相色谱‑蒸发光检测器纯度检查，不同流动相测定结果表明均为一个主色谱峰，改变流动相测定均未出现异常峰；以HPLC‑ELSD峰面积归一化法和不加校正因子的主成分自身对照法测定质量分数大于98%，符合含量测定用中药化学对照品的要求。而且本发明方法提取完全，产率高；有机溶剂用量少，成本低。

主权项

一种鹰嘴豆三萜皂苷3β‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基‑(1→2)‑β‑D‑吡喃半乳糖基‑22β,24‑二羟基‑齐墩果‑12‑烯对照品的制备方法，其特征在于包括以下步骤：a）鹰嘴豆粗粉中加50%‑90%乙醇回流提取三次，每次用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的8倍以升计体积量，每次2小时，分次滤过，滤液合并，减压回收乙醇得鹰嘴豆提取物；b）将步骤a）获得的提取物加0.5%~2%氢氧化钾75%乙醇溶液使溶解，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，室温放置2小时~48小时，加稀盐酸调节pH值至7，加水调节醇浓度，用量为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的10倍以升计体积量，混匀得鹰嘴豆提取物碱修饰液；c）将步骤b）获得的鹰嘴豆提取物碱修饰液加于大孔吸附树脂D101柱色谱，填充大孔吸附树脂体积为以公斤计鹰嘴豆粗粉重量的0.5倍以升计体积量，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用30%乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，用70%乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得鹰嘴豆三萜皂苷提取物；d）将步骤c）获得的鹰嘴豆三萜皂苷提取物经制备高效液相色谱，色谱柱：十八烷基键合硅胶，流动相为65%体积甲醇、34.8%体积水和0.2%体积冰乙酸，同步采用示差折光检测器监视流出曲线以指导产品收集，收集液经减压浓缩，干燥后得3β‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基‑(1→2)‑β‑D‑吡喃半乳糖基‑22β,24‑二羟基‑齐墩果‑12‑烯，上述成分是由下述式表示的化合物，。