[发明专利]一种便潜血乳胶增强免疫比浊试剂盒

摘要

本发明公开了一种便潜血乳胶增强免疫比浊试剂盒，包括R1试剂、R2试剂和人血红蛋白校准品；R1试剂包括甘氨酸缓冲液；PEG6000和ProClin‑300；R2试剂包括：甘氨酸缓冲液、兔抗人血红蛋白包被的乳胶微球、牛血清白蛋白、Tween‑20、海藻糖、ProClin‑300；所述试剂R2中的乳胶微球的粒径为60‑220nm，血红蛋白抗体为兔抗人血红蛋白多克隆抗体，与聚苯乙烯乳胶微球之间以共价偶联方式连接。本发明乳胶增强免疫比浊检测结果，客观反应出血量，便于观察病情变化；全自动操作模式，检测过程更加方便、快捷，可以批量式进行检验，更适用于大规模人群的筛查实验。

主权项

1.一种便潜血乳胶增强免疫比浊试剂盒，其特征是包括R1试剂、R2试剂和人血红蛋白校准品；所述R1试剂由下述组分组成：甘氨酸缓冲液0.1M；PEG60002wt％；ProClin‑300 0.1wt％；pH＝7.4；余量为水；R2试剂由下述方法制成：(1)选取粒径为60‑220nm的100mg聚苯乙烯羧基微球，用50mM的pH＝5.5的MES缓冲液清洗1‑3次，用50mM的pH＝5.5的MES缓冲液稀释至10ml；(2)向步骤(1)获得的10ml悬浮液中加入1～6mg的N‑羟基硫代琥珀酰亚胺，混匀，加入1～2mg的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐，避光搅拌下反应15～30min，15000rpm，离心15‑45min，弃上清；(3)用9ml的pH＝8.0的硼酸缓冲液重悬步骤(2)获得的离心产物，以超声2秒间隔2秒的方式超声处理，至悬浮液均一，加入0.1～3.0mg抗人血红蛋白多克隆抗体，在搅拌下反应2～4h，15000rpm，离心15‑30min，弃上清。(4)向步骤(3)获得的离心产物中加入10ml封闭液，在旋转混匀仪上反应30‑60min，所述封闭液的组成为20mM的pH＝7.4的PBS、1wt％牛血清白蛋白、0.5wt％ProCline‑300，余量为水；(5)15000rpm，离心15‑45min，弃上清，离心产物用50mM的pH＝7.2的PBS清洗2‑3次，离心；(6)向步骤(5)获得的离心产物中加入10ml的保存液超声悬浮，得到抗人血红蛋白多克隆抗体包被的乳胶微球，所述保存液的组成为：0.01M～0.1M甘氨酸缓冲液、0.1wt％～1wt％牛血清白蛋白、0.5wt％～2wt％Tween‑20、1wt％～5wt％海藻糖、0.05wt％～0.5wt％ProClin‑300，pH＝7.0～9.0；余量为水。