[发明专利]一种鉴别猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和/或流行毒株一步法RT‑PCR诊断试剂盒

摘要

本发明提供一种鉴别猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和/或流行毒株一步法RT‑PCR诊断试剂盒，包括20μL RT‑PCR一步法酶、250μL酶缓冲液、300μL RNase Free dH2O、40μL混合引物、20μL阳性对照、20μL阴性对照、80μL DL2000及25μL 6×Loading Buffer；该试剂盒，与现有技术相比，具有操作简单，反转录与PCR扩增一步完成，减少了反应时间，避免了模板RNA的降解，提高了检测的敏感性等优点。该引物对猪传染性胃肠炎病毒、猪A群轮状病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒和猪捷申病毒的扩增结果均为阴性，该方法最低能检出1pg的猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和1pg的流行毒株模板，本试剂盒能广泛应用于基层检测机构，对猪场流行性腹泻病毒病的早期鉴别诊断、防控及净化有重要意义。

主权项

一种鉴别猪流行性腹泻病毒疫苗弱毒株和/或流行毒株一步法RT‑PCR诊断试剂盒，其特征在于：其包括20μL RT‑PCR一步法酶、250μL酶缓冲液、300μL Rnase Freed H2O、40μL混合引物、20μL 阳性对照、20μL阴性对照、80μL DL2000及25μL 6×Loading Buffer，所述混合引物包括上游引物P1：5'‑AGTCTGCCAACTTGTCTT‑3'，下游引物P2：5'‑AGTAAAAGCAGACTAAACAAAGCCT‑3'。